Gå direkt till innehållet
BT-474-celler
Vävnad
Bröst, bröstkörtel
Sjukdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastaseringsställe
Duktal
Synonymer
Bt-474, BT474

BT-474-celler

Cell line · Produktnummer 300131

BT-474 är en cellinje från mänsklig bröstcancer, som härrör från ett duktalt karcinom hos en 60-årig kvinna. Denna cellinje har östrogen- och progesteronreceptorer...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

BT-474 är en human bröstcancercellinje som härrör från ett duktalt karcinom hos en 60-årig kvinna. Denna cellinje är östrogen- och progesteronreceptorpositiv, vilket gör den till en värdefull modell för studier av hormonresponsiva bröstcancerformer. BT-474-cellerna kännetecknas också av överuttryck av HER2/neu (human epidermal growth factor receptor 2), ett protein som är förstärkt och spelar en avgörande roll i patogenesen och utvecklingen av vissa aggressiva typer av bröstcancer.

BT-474-cellinjen används i stor utsträckning inom onkologisk forskning för att studera de molekylära mekanismerna bakom bröstcancerspridning och för att testa terapeutiska strategier inriktade på hormonreceptorer och HER2-vägen. Dessa celler är särskilt användbara för att undersöka effekten av HER2-riktade behandlingar, som trastuzumab (Herceptin), och för att utforska mekanismerna bakom resistens mot dessa behandlingar. Cellinjen har också bidragit till att öka förståelsen för hur hormonella manipulationer påverkar cancercellers tillväxt och överlevnad, vilket ger insikter om potentiella behandlingsmetoder för hormonberoende tumörer.

Vävnad
Bröst, bröstkörtel
Sjukdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastaseringsställe
Duktal
Synonymer
  • Bt-474
  • BT474

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss
MSI-status
Stabilt (MSS)
Karyotyp
Läge = 55, intervall = 50 till 112, bimodal förändring 58 - 59 och 100 i senare avsnitt med 3 markörkromosomer
Fördubblingstid
60 till 80 timmar

04Identifierare

Källa
BT-474 (Cytion katalognummer 300131)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
HENNE-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzymer
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotyp Frekvens Produkt: 0.0426
Mutationsprofil
TP53 mut
Virusmottaglighet
Musens brösttumörvirus (RIII-MuMTV)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS, 10 mikrogram/mL insulin
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 x 104 celler/cm2 ger ett nästan helt sammanväxt lager på cirka 4 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Nästan 100% återvunna celler med >90% viabilitet
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
60 år
Etnicitet
Kaukasisk