.jpg)
- Vävnad
- Bröst, bröstkörtel
- Sjukdom
- Invasivt duktalt karcinom
- Metastaseringsställe
- Duktal
- Synonymer
- Bt-474, BT474
Dokument
BT-474-celler
Cell line · Produktnummer 300131
BT-474 är en cellinje från mänsklig bröstcancer, som härrör från ett duktalt karcinom hos en 60-årig kvinna. Denna cellinje har östrogen- och progesteronreceptorer...
Anpassning / Rekommendationer
- BT-474-cellerCell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
BT-474 är en human bröstcancercellinje som härrör från ett duktalt karcinom hos en 60-årig kvinna. Denna cellinje är östrogen- och progesteronreceptorpositiv, vilket gör den till en värdefull modell för studier av hormonresponsiva bröstcancerformer. BT-474-cellerna kännetecknas också av överuttryck av HER2/neu (human epidermal growth factor receptor 2), ett protein som är förstärkt och spelar en avgörande roll i patogenesen och utvecklingen av vissa aggressiva typer av bröstcancer.
BT-474-cellinjen används i stor utsträckning inom onkologisk forskning för att studera de molekylära mekanismerna bakom bröstcancerspridning och för att testa terapeutiska strategier inriktade på hormonreceptorer och HER2-vägen. Dessa celler är särskilt användbara för att undersöka effekten av HER2-riktade behandlingar, som trastuzumab (Herceptin), och för att utforska mekanismerna bakom resistens mot dessa behandlingar. Cellinjen har också bidragit till att öka förståelsen för hur hormonella manipulationer påverkar cancercellers tillväxt och överlevnad, vilket ger insikter om potentiella behandlingsmetoder för hormonberoende tumörer.
- Vävnad
- Bröst, bröstkörtel
- Sjukdom
- Invasivt duktalt karcinom
- Metastaseringsställe
- Duktal
- Synonymer
- Bt-474
- BT474
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Tumörframkallande
- Ja, i nakna möss
- MSI-status
- Stabilt (MSS)
- Karyotyp
- Läge = 55, intervall = 50 till 112, bimodal förändring 58 - 59 och 100 i senare avsnitt med 3 markörkromosomer
- Fördubblingstid
- 60 till 80 timmar
04Identifierare
- Källa
- BT-474 (Cytion katalognummer 300131)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0179
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- HENNE-2/NEU+, ER+, PR+
- Isoenzymer
- G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotyp Frekvens Produkt: 0.0426
- Mutationsprofil
- TP53 mut
- Virusmottaglighet
- Musens brösttumörvirus (RIII-MuMTV)
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS, 10 mikrogram/mL insulin
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Såtäthet
- 2 x 104 celler/cm2 ger ett nästan helt sammanväxt lager på cirka 4 dagar.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Nästan 100% återvunna celler med >90% viabilitet
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 60 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja