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Cellules BT-549
Tissu
Sein, glande mammaire
Maladie
Carcinome canalaire invasif
Site métastatique
Ductal
Synonymes
BT 549, BT.549, BT549

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Cellules BT-549

Cell line · Référence du produit 300132

Les cellules BT-549 constituent une lignée cellulaire de cancer du sein humain issue du tissu mammaire d'une femme caucasienne de 72 ans atteinte d'un carcinome canalaire. Elles sont co...

€430.00hors taxes et frais de port
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1

01Informations générales

Description

Les cellules BT-549 sont une lignée cellulaire humaine de cancer du sein dérivée du tissu de la glande mammaire d'une femme caucasienne de 72 ans atteinte d'un carcinome canalaire. Elles sont couramment utilisées dans la recherche sur le cancer pour étudier la biologie et le traitement du cancer du sein, en particulier le sous-type triple négatif, qui ne présente pas d'expression des récepteurs des œstrogènes, des récepteurs de la progestérone et de HER2.

Les cellules BT-549 se caractérisent par leur morphologie épithéliale et sont connues pour leurs propriétés hautement invasives, ce qui en fait un modèle précieux pour l'étude des métastases et de l'invasion tumorale. Elles présentent plusieurs caractéristiques distinctives, notamment la présence de gouttelettes lipidiques dans le cytoplasme et une forte expression de la protéine mucine-1. Ces cellules expriment également divers oncogènes et gènes suppresseurs de tumeurs pertinents pour la pathologie du cancer du sein, tels que TP53 et RB1.

La lignée cellulaire BT-549 est négative pour les récepteurs d'œstrogènes et de progestérone et n'amplifie pas HER2, ce qui la classe dans le sous-type du cancer du sein triple négatif (TNBC). En raison de cette classification, les cellules BT-549 sont particulièrement utiles pour étudier les mécanismes uniques de progression et de réponse au traitement dans le TNBC, qui est connu pour sa nature agressive et l'absence de thérapies ciblées.

En outre, les cellules BT-549 sont souvent utilisées dans les études de résistance aux médicaments et pour tester de nouveaux agents chimiothérapeutiques et des thérapies ciblées, offrant ainsi un aperçu des stratégies thérapeutiques potentielles pour la gestion et le traitement des formes agressives de cancer du sein.

Tissu
Sein, glande mammaire
Maladie
Carcinome canalaire invasif
Site métastatique
Ductal
Synonymes
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Caryotype
Mode = 74, intervalle = 53 à 140, trois chromosomes marqueurs

04Identifiants

Référence
BT-549 (numéro de catalogue Cytion 300132)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expression et sensibilité

Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fréquence du phénotype Produit : 0.0048
Profil mutationnel
TP53 mut

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera une couche confluente en environ 4 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
72 ans
Origine ethnique
Caucasien