Siirry sisältöön
BT-549-solut
Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Ductal
Synonyymit
BT 549, BT.549, BT549

Asiakirjat

BT-549-solut

Cell line · Tuotenumero 300132

BT-549-solut ovat ihmisen rintasyöpäsolulinja, joka on peräisin 72-vuotiaan valkoihoisen naisen, jolla oli duktaalinen karsinooma, rintarauhaskudoksesta. Ne ovat...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BT-549-solut ovat ihmisen rintasyöpäsolulinja, joka on peräisin 72-vuotiaan valkoihoisen naisen rintarauhaskudoksesta, jolla oli duktaalikarsinooma. Niitä käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa rintasyövän biologian ja hoidon tutkimiseen, erityisesti kolmoisnegatiivisen alatyypin, josta puuttuu estrogeenireseptorin, progesteronireseptorin ja HER2:n ilmentyminen.

BT-549-soluille on ominaista niiden epiteelimorfologia, ja ne ovat tunnettuja erittäin invasiivisista ominaisuuksistaan, mikä tekee niistä arvokkaan mallin metastaasien ja kasvaimen invaasion tutkimiseen. Niillä on useita erityispiirteitä, kuten lipidipisaroiden esiintyminen sytoplasmassa ja mucin-1-proteiinin voimakas ilmentyminen. Nämä solut ilmentävät myös useita rintasyövän patologian kannalta merkityksellisiä onkogeenejä ja kasvainsuppressorigeenejä, kuten TP53 ja RB1.

BT-549-solulinja on estrogeenireseptorinegatiivinen, progesteronireseptorinegatiivinen, eikä se monista HER2:ta, joten se kuuluu kolmoisnegatiivisen rintasyövän (TNBC) alatyyppiin. Tämän luokittelun vuoksi BT-549-solut ovat erityisen käyttökelpoisia tutkittaessa TNBC:n ainutlaatuisia etenemis- ja hoitovastusmekanismeja, sillä TNBC on tunnettu aggressiivisesta luonteestaan ja kohdennettujen hoitojen puutteesta.

Lisäksi BT-549-soluja käytetään usein lääkeresistenssitutkimuksissa sekä uusien kemoterapeuttisten aineiden ja kohdennettujen hoitojen testaamiseen, mikä tarjoaa tietoa mahdollisista hoitostrategioista aggressiivisten rintasyöpämuotojen hallitsemiseksi ja hoitamiseksi.

Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Ductal
Synonyymit
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Karyotyyppi
Tila = 74, vaihteluväli = 53-140, kolme merkkikromosomia

04Tunnisteet

Lähdeviite
BT-549 (Cytionin luettelonumero 300132)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0048
Mutaatioprofiili
TP53 mut

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
72 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen