Gå direkte til indholdet
BT-549-celler
Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Duktal
Synonymer
BT 549, BT.549, BT549

Dokumenter

BT-549-celler

Cell line · Varenummer 300132

BT-549-celler er en human brystkræftcellelinje, der stammer fra brystkirtelvæv fra en 72-årig kaukasisk kvinde med duktalt karcinom. De er co...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

BT-549-celler er en menneskelig brystkræftcellelinje, der stammer fra brystkirtelvæv fra en 72-årig kaukasisk kvinde med duktalt karcinom. De bruges ofte i kræftforskning til at studere biologien og behandlingen af brystkræft, især den triple-negative subtype, som mangler østrogenreceptor, progesteronreceptor og HER2-ekspression.

BT-549-celler er kendetegnet ved deres epitelmorfologi og er kendt for deres meget invasive egenskaber, hvilket gør dem til en værdifuld model til undersøgelse af metastase og tumorinvasion. De udviser flere karakteristiske træk, herunder tilstedeværelsen af lipiddråber i cytoplasmaet og et robust udtryk for mucin-1-proteinet. Disse celler udtrykker også forskellige onkogener og tumorsuppressorgener, der er relevante for brystkræftpatologi, såsom TP53 og RB1.

BT-549-cellelinjen er østrogenreceptor-negativ, progesteronreceptor-negativ og forstærker ikke HER2, hvilket kategoriserer den under subtypen triple-negativ brystkræft (TNBC). På grund af denne klassificering er BT-549-celler særligt nyttige til at studere de unikke mekanismer for progression og behandlingsrespons i TNBC, som er kendt for sin aggressive natur og mangel på målrettede terapier.

Desuden bruges BT-549-celler ofte i undersøgelser af lægemiddelresistens og til at teste nye kemoterapeutiske midler og målrettede terapier, hvilket giver indsigt i potentielle terapeutiske strategier til håndtering og behandling af aggressive former for brystkræft.

Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Duktal
Synonymer
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
Mode = 74, interval = 53 til 140, tre markørkromosomer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-549 (Cytion katalognummer 300132)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Udtryk og modtagelighed

Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0048
Mutationsprofil
TP53 mut

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil danne et sammenhængende lag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
72 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk