Tartalomra ugrás
BT-549 sejtek
Szövet
Mell, emlőmirigy
Betegség
Invazív ductus carcinoma
Áttétes hely
Ductus
Szinonimák
BT 549, BT.549, BT549

Dokumentumok

BT-549 sejtek

Cell line · Termékszám 300132

A BT-549 sejtek egy emberi emlőrák-sejtvonal, amelyet egy 72 éves, kaukázusi származású, ductalis karcinómában szenvedő nő emlőmirigy-szövetéből nyertek ki. Ezek a sejtek...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BT-549 sejtek emberi emlőrákos sejtvonal, amely egy 72 éves kaukázusi nő emlőmirigy-szövetéből származik, és duktális karcinómában szenved. A rákkutatásban gyakran használják őket az emlőrák biológiájának és kezelésének tanulmányozására, különösen a tripla-negatív altípus esetében, amelyből hiányzik az ösztrogénreceptor, a progeszteronreceptor és a HER2 expressziója.

A BT-549 sejteket epithelialis morfológiájuk jellemzi, és ismertek erősen invazív tulajdonságaikról, ami értékes modellé teszi őket az áttétképződés és a tumorinvázió tanulmányozására. Számos jellegzetes tulajdonságot mutatnak, beleértve a lipidcseppek jelenlétét a citoplazmában és a mucin-1 fehérje erőteljes expresszióját. Ezek a sejtek különböző, az emlőrák patológiájában fontos onkogéneket és tumorszupresszor géneket is expresszálnak, mint például a TP53 és az RB1.

A BT-549 sejtvonal ösztrogénreceptor-negatív, progeszteronreceptor-negatív, és nem amplifikálja a HER2-t, így a tripla-negatív emlőrák (TNBC) altípusba sorolható. Ennek a besorolásnak köszönhetően a BT-549 sejtek különösen hasznosak a TNBC egyedi progressziós mechanizmusainak és a kezelésre adott válasznak a tanulmányozására, amely agresszív természetéről és a célzott terápiák hiányáról ismert.

Továbbá a BT-549 sejteket gyakran használják gyógyszerrezisztencia-vizsgálatokban, valamint új kemoterápiás szerek és célzott terápiák tesztelésére, betekintést nyújtva az emlőrák agresszív formáinak kezelésére és kezelésére szolgáló lehetséges terápiás stratégiákba.

Szövet
Mell, emlőmirigy
Betegség
Invazív ductus carcinoma
Áttétes hely
Ductus
Szinonimák
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kariotípus
Módusz = 74, tartomány = 53-140, három marker kromoszóma

04Azonosítók

Hivatkozás
BT-549 (Cytion katalógusszám: 300132)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Kifejeződés és fogékonyság

Izoenzimek
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0048
Mutációs profil
TP53 mut

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
72 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi