Prejsť na obsah
Bunky BT-549
Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Miesto metastáz
Duktálny
Synonymá
BT 549, BT.549, BT549

Dokumenty

Bunky BT-549

Cell line · Číslo výrobku 300132

Bunky BT-549 sú ľudská bunková línia rakoviny prsníka, ktorá pochádza z tkaniva mliečnej žľazy 72-ročnej ženy kaukazského pôvodu s duktálnym karcinómom. Sú to...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky BT-549 sú ľudskou bunkovou líniou karcinómu prsníka získanou z tkaniva mliečnej žľazy 72-ročnej ženy kaukazského pôvodu s duktálnym karcinómom. Bežne sa využívajú v onkologickom výskume na štúdium biológie a liečby rakoviny prsníka, najmä triple-negatívneho podtypu, ktorý nemá expresiu estrogénového receptora, progesterónového receptora a HER2.

Bunky BT-549 sa vyznačujú epitelovou morfológiou a sú známe svojimi vysoko invazívnymi vlastnosťami, čo z nich robí cenný model na štúdium metastáz a nádorovej invázie. Vykazujú niekoľko charakteristických znakov vrátane prítomnosti lipidových kvapôčok v cytoplazme a silnej expresie proteínu mucín-1. Tieto bunky tiež exprimujú rôzne onkogény a tumor supresorové gény, ktoré sú dôležité pre patológiu rakoviny prsníka, ako napríklad TP53 a RB1.

Bunková línia BT-549 je negatívna na estrogénové receptory, progesterónové receptory a neamplifikuje HER2, čím sa zaraďuje do podtypu trojito negatívnej rakoviny prsníka (TNBC). Vďaka tomuto zaradeniu sú bunky BT-549 obzvlášť užitočné na štúdium jedinečných mechanizmov progresie a odpovede na liečbu v prípade TNBC, ktorý je známy svojou agresívnou povahou a nedostatkom cielenej liečby.

Okrem toho sa bunky BT-549 často používajú v štúdiách rezistencie voči liekom a na testovanie nových chemoterapeutík a cielených terapií, ktoré ponúkajú poznatky o potenciálnych terapeutických stratégiách na zvládanie a liečbu agresívnych foriem rakoviny prsníka.

Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Miesto metastáz
Duktálny
Synonymá
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Karyotyp
Režim = 74, rozsah = 53 až 140, tri markerové chromozómy

04Identifikátory

Citácia
BT-549 (katalógové číslo Cytion 300132)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Prejav a náchylnosť

Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, produkt frekvencie fenotypov: 0.0048
Mutčný profil
Mutácia TP53

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú vrstvu za približne 4 dni.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
72 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský