Mine otse sisu juurde
BT-549 rakud
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
BT 549, BT.549, BT549

Dokumendid

BT-549 rakud

Cell line · Toote number 300132

BT-549 rakud on inimese rinnavähi rakuliin, mis on saadud 72-aastase kaukaasia päritolu naise, kellel oli duktaalne kartsinoom, rinnanäärmekoest. Need on ko...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BT-549 rakud on inimese rinnavähi rakuliin, mis on saadud 72-aastase kaukaasia naise ductus-kartsinoomiga rinnanäärme koest. Neid kasutatakse tavaliselt vähiuuringutes, et uurida rinnavähi bioloogiat ja ravi, eriti kolmiknegatiivset alatüüpi, millel puudub östrogeeni retseptori, progesterooni retseptori ja HER2 ekspressioon.

BT-549 rakke iseloomustab nende epiteliaalne morfoloogia ja nad on tuntud oma väga invasiivsete omaduste poolest, mis teeb neist väärtusliku mudeli metastaaside ja kasvaja invasiivsuse uurimiseks. Neil on mitmeid eripäraseid tunnuseid, sealhulgas lipiidipisarate olemasolu tsütoplasmas ja mucin-1 valgu tugev ekspressioon. Need rakud ekspresseerivad ka mitmeid rinnavähi patoloogias olulisi onkogeene ja kasvajasupressorgeene, nagu TP53 ja RB1.

BT-549 rakuliin on östrogeeniretseptor-negatiivne, progesterooniretseptor-negatiivne ja ei amplifitseeri HER2, mistõttu liigitatakse see kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) alatüübi alla. Selle liigituse tõttu on BT-549 rakud eriti kasulikud TNBC unikaalsete progressiooni ja ravivastuse mehhanismide uurimiseks, mis on tuntud oma agressiivse iseloomu ja sihtotstarbeliste ravimeetodite puudumise poolest.

Lisaks kasutatakse BT-549 rakke sageli ravimresistentsuse uuringutes ning uute kemoterapeutiliste ainete ja sihtotstarbeliste ravimeetodite testimiseks, mis annab ülevaate võimalikest ravistrateegiatest rinnavähi agressiivsete vormide ohjamiseks ja ravimiseks.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Karyotüüp
Režiim = 74, vahemik = 53 kuni 140, kolm marker-kromosoomi

04Tunnused

Viide
BT-549 (Cytioni katalooginumber 300132)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, fenotüübi sageduse toode: 0.0048
Mutatsiooniprofiil
TP53 mut

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
72 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia