Przejdź do treści
Komórki BT-549
Chusteczka
Piersi, gruczoł sutkowy
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Kanałowy
Synonimy
BT 549, BT.549, BT549

Dokumenty

Komórki BT-549

Cell line · Numer produktu 300132

Komórki BT-549 to ludzka linia komórkowa raka piersi, wyhodowana z tkanki gruczołu sutkowego 72-letniej kobiety rasy kaukaskiej cierpiącej na raka przewodowego. Są one...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki BT-549 to ludzka linia komórkowa raka piersi pochodząca z tkanki gruczołu sutkowego 72-letniej kobiety rasy kaukaskiej z rakiem przewodowym. Są one powszechnie wykorzystywane w badaniach nad rakiem do badania biologii i leczenia raka piersi, w szczególności podtypu potrójnie ujemnego, w którym brakuje receptora estrogenowego, receptora progesteronowego i ekspresji HER2.

Komórki BT-549 charakteryzują się morfologią nabłonkową i są znane ze swoich wysoce inwazyjnych właściwości, co czyni je cennym modelem do badania przerzutów i inwazji guza. Wykazują one kilka charakterystycznych cech, w tym obecność kropelek lipidów w cytoplazmie i silną ekspresję białka mucyny-1. Komórki te wyrażają również różne onkogeny i geny supresorowe nowotworów, które są istotne dla patologii raka piersi, takie jak TP53 i RB1.

Linia komórkowa BT-549 jest ujemna pod względem receptora estrogenowego, ujemna pod względem receptora progesteronowego i nie amplifikuje HER2, co klasyfikuje ją do podtypu potrójnie ujemnego raka piersi (TNBC). Ze względu na tę klasyfikację, komórki BT-549 są szczególnie przydatne do badania unikalnych mechanizmów progresji i odpowiedzi na leczenie w TNBC, który jest znany ze swojej agresywnej natury i braku terapii celowanych.

Co więcej, komórki BT-549 są często wykorzystywane w badaniach oporności na leki oraz do testowania nowych środków chemioterapeutycznych i terapii celowanych, oferując wgląd w potencjalne strategie terapeutyczne w leczeniu agresywnych form raka piersi.

Chusteczka
Piersi, gruczoł sutkowy
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Kanałowy
Synonimy
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Karyotyp
Tryb = 74, zakres = 53 do 140, trzy chromosomy markerowe

04Identyfikatory

Źródło
BT-549 (numer katalogowy Cytion 300132)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Ekspresja i podatność

Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0048
Profil mutacji
TP53 mut

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 utworzy zlewającą się warstwę w ciągu około 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
72 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski