الانتقال إلى المحتوى
خلايا BT-549
الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
موقع الانتشار
الأقنية
المرادفات
BT 549, BT.549, BT549

المستندات

خلايا BT-549

Cell line · رقم المنتج 300132

خلايا BT-549 هي سلالة خلوية لسرطان الثدي البشري مستمدة من نسيج الغدة الثديية لامرأة قوقازية تبلغ من العمر 72 عامًا مصابة بسرطان القنوات. وهي...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا BT-549 هي خط خلايا سرطان الثدي البشري المشتق من نسيج الغدة الثديية لامرأة قوقازية تبلغ من العمر 72 عاماً مصابة بسرطان الأقنية. تُستخدم هذه الخلايا عادةً في أبحاث السرطان لدراسة بيولوجيا سرطان الثدي وعلاجه، وخاصةً النوع الفرعي الثلاثي السلبي، الذي يفتقر إلى مستقبلات الإستروجين ومستقبلات البروجسترون وتعبير HER2.

تتميز خلايا BT-549 بتشكلها الظهاري وهي معروفة بخصائصها الغازية للغاية، مما يجعلها نموذجاً قيماً لدراسة النقائل وغزو الورم. تُظهر هذه الخلايا العديد من السمات المميزة بما في ذلك وجود قطرات دهنية في السيتوبلازم والتعبير القوي عن بروتين الميوسين-1. تعبر هذه الخلايا أيضًا عن العديد من الجينات الورمية والجينات الكابتة للورم ذات الصلة بعلم أمراض سرطان الثدي، مثل TP53 وRB1.

إن خط خلايا BT-549 سالب لمستقبلات الإستروجين، ومستقبلات البروجسترون سالبة، ولا تضخم مستقبلات هرمون النمو HER2، وبالتالي تصنف تحت النوع الفرعي لسرطان الثدي الثلاثي السلبي (TNBC). ونظراً لهذا التصنيف، تُعد خلايا BT-549 مفيدة بشكل خاص لدراسة الآليات الفريدة لتطور المرض والاستجابة للعلاج في سرطان الثدي الثلاثي السالب، والمعروف بطبيعته العدوانية ونقص العلاجات الموجهة.

علاوة على ذلك، غالبًا ما تُستخدم خلايا BT-549 في دراسات مقاومة الأدوية واختبار عوامل العلاج الكيميائي الجديدة والعلاجات الموجهة، مما يوفر رؤى حول الاستراتيجيات العلاجية المحتملة لإدارة وعلاج الأشكال العدوانية لسرطان الثدي.

الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
موقع الانتشار
الأقنية
المرادفات
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
النمط الكروموسومي
النمط = 74، النطاق = 53 إلى 140، ثلاثة كروموسومات مؤشِّرة

04المعرّفات

المرجع
BT-549 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300132)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1092

05التعبير والقابلية للإصابة

الإيزوزيمات
G6PD، ب، PGM1، 2، PGM3، 1، ES-D، 1، Me-2، 1، AK-1، 1، GLO-1، 1-2، منتج تردد النمط الظاهري: 0.0048
الأنماط الطفريّة
طفرة TP53

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
72 سنة
الأصل العرقي
قوقازي