Pereiti prie turinio
BT-549 ląstelės
Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Metastazių vieta
Duktalinis
Sinonimai
BT 549, BT.549, BT549

Dokumentai

BT-549 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300132

BT-549 ląstelės yra žmogaus krūties vėžio ląstelių linija, gauta iš 72 metų amžiaus kaukazietės moters, sergančios duktaline karcinoma, pieno liaukos audinio. Jos yra...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

BT-549 ląstelės yra žmogaus krūties vėžio ląstelių linija, gauta iš 72 metų kaukazietės moters, sergančios latakine karcinoma, pieno liaukos audinio. Jos dažnai naudojamos vėžio tyrimuose, tiriant krūties vėžio biologiją ir gydymą, ypač trigubai neigiamo potipio, kuriame nėra estrogenų receptorių, progesterono receptorių ir HER2 raiškos.

BT-549 ląstelės pasižymi epitelio morfologija ir pasižymi itin invazinėmis savybėmis, todėl yra vertingas modelis metastazėms ir naviko invazijai tirti. Joms būdingi keli išskirtiniai bruožai, įskaitant lipidų lašelius citoplazmoje ir stiprią mucin-1 baltymo raišką. Šiose ląstelėse taip pat ekspresuojami įvairūs krūties vėžio patologijai svarbūs onkogenai ir naviką slopinantys genai, pavyzdžiui, TP53 ir RB1.

BT-549 ląstelių linija yra neigiama estrogenų receptoriams, neigiama progesterono receptoriams ir neturi HER2 amplifikacijos, todėl priskiriama trigubai neigiamo krūties vėžio (TNBC) potipiui. Dėl šios klasifikacijos BT-549 ląstelės yra ypač naudingos tiriant unikalius TNBC, kuris pasižymi agresyvumu ir taikinių terapijos trūkumu, progresavimo ir atsako į gydymą mechanizmus.

Be to, BT-549 ląstelės dažnai naudojamos atsparumo vaistams tyrimams ir naujų chemoterapinių preparatų bei tikslinės terapijos bandymams, todėl galima susipažinti su galimomis terapinėmis strategijomis, skirtomis agresyvioms krūties vėžio formoms valdyti ir gydyti.

Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Metastazių vieta
Duktalinis
Sinonimai
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Kariotipas
Režimas = 74, intervalas = 53-140, trys žymėjimo chromosomos

04Identifikatoriai

Nuoroda
BT-549 (Cytion katalogo numeris 300132)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotipo dažnio produktas: 0.0048
Mutacijų profilis
TP53 mutavimas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
72 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių