Gå til innholdet
BT-549-celler
Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Duktal
Synonymer
BT 549, BT.549, BT549

Dokumenter

BT-549-celler

Cell line · Produktnummer 300132

BT-549-celler er en human brystkreftcellelinje som stammer fra brystkjertelvevet til en 72 år gammel kaukasisk kvinne med duktalt karsinom. De er ko...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

BT-549-celler er en human brystkreftcellelinje som stammer fra brystkjertelvev fra en 72 år gammel kaukasisk kvinne med duktalt karsinom. De brukes ofte i kreftforskning for å studere biologi og behandling av brystkreft, særlig den trippelnegative subtypen, som mangler østrogenreseptor-, progesteronreseptor- og HER2-uttrykk.

BT-549-celler kjennetegnes av sin epitelmorfologi og er kjent for sine svært invasive egenskaper, noe som gjør dem til en verdifull modell for studier av metastaser og tumorinvasjon. De har flere karakteristiske trekk, blant annet tilstedeværelsen av lipiddråper i cytoplasmaet og et robust uttrykk av mucin-1-proteinet. Disse cellene uttrykker også ulike onkogener og tumorsuppressorgener som er relevante for brystkreftpatologi, for eksempel TP53 og RB1.

BT-549-cellelinjen er østrogenreseptor-negativ, progesteronreseptor-negativ og amplifiserer ikke HER2, noe som kategoriserer den under subtypen trippelnegativ brystkreft (TNBC). På grunn av denne klassifiseringen er BT-549-celler spesielt nyttige for å studere de unike mekanismene for progresjon og behandlingsrespons i TNBC, som er kjent for sin aggressive natur og mangel på målrettede terapier.

BT-549-celler brukes dessuten ofte i studier av legemiddelresistens og til utprøving av nye kjemoterapeutiske midler og målrettede behandlinger, noe som gir innsikt i potensielle behandlingsstrategier for håndtering og behandling av aggressive former for brystkreft.

Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Duktal
Synonymer
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
Modus = 74, intervall = 53 til 140, tre markørkromosomer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-549 (Cytion-katalognummer 300132)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Uttrykk og mottakelighet

Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0048
Mutasjonsprofil
TP53 mut

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
72 år
Etnisitet
Kaukasisk