Ir diretamente para o conteúdo
Células BT-549
Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
BT 549, BT.549, BT549

Documentos

Células BT-549

Cell line · Número do produto 300132

As células BT-549 são uma linha celular de cancro da mama humana derivada do tecido da glândula mamária de uma mulher caucasiana de 72 anos com carcinoma ductal. São co...

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

As células BT-549 são uma linha celular de cancro da mama humano derivada do tecido da glândula mamária de uma mulher caucasiana de 72 anos com carcinoma ductal. São habitualmente utilizadas na investigação do cancro para estudar a biologia e o tratamento do cancro da mama, em especial o subtipo triplo-negativo, que carece de expressão do recetor de estrogénio, do recetor de progesterona e do HER2.

As células BT-549 caracterizam-se pela sua morfologia epitelial e são conhecidas pelas suas propriedades altamente invasivas, o que as torna um modelo valioso para o estudo das metástases e da invasão tumoral. Apresentam várias caraterísticas distintivas, incluindo a presença de gotículas de lípidos no citoplasma e uma expressão robusta da proteína mucina-1. Estas células também expressam vários oncogenes e genes supressores de tumores que são relevantes para a patologia do cancro da mama, como o TP53 e o RB1.

A linha celular BT-549 é negativa para o recetor de estrogénio, negativa para o recetor de progesterona e não amplifica o HER2, classificando-a assim no subtipo de cancro da mama triplo-negativo (TNBC). Devido a esta classificação, as células BT-549 são particularmente úteis para estudar os mecanismos únicos de progressão e resposta ao tratamento no TNBC, que é conhecido pela sua natureza agressiva e pela falta de terapias direcionadas.

Além disso, as células BT-549 são frequentemente utilizadas em estudos de resistência a medicamentos e para testar novos agentes quimioterapêuticos e terapias orientadas, oferecendo informações sobre potenciais estratégias terapêuticas para gerir e tratar formas agressivas de cancro da mama.

Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Cariótipo
Modo = 74, intervalo = 53 a 140, três cromossomas marcadores

04Identificadores

Referência
BT-549 (número de catálogo Cytion 300132)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Produto de frequência fenotípica: 0.0048
Perfil mutacional
TP53 mut

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² produzirá uma camada confluente em cerca de 4 dias
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
72 anos
Etnia
Caucasiano