Премини към съдържанието
Клетки BT-549
Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Дуктален
Синоними
BT 549, BT.549, BT549

Документи

Клетки BT-549

Cell line · Номер на продукта 300132

Клетките BT-549 представляват клетъчна линия от човешки рак на гърдата, получена от тъкан на млечната жлеза на 72-годишна жена от кавказката раса с дуктален карцином. Те са...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките BT-549 са човешка клетъчна линия за рак на гърдата, получена от тъканта на млечната жлеза на 72-годишна кавказка жена с дуктален карцином. Те често се използват в изследванията на рака за изучаване на биологията и лечението на рака на гърдата, особено на тройно негативния подтип, при който липсва експресия на естрогеновия рецептор, прогестероновия рецептор и HER2.

Клетките BT-549 се характеризират с епителна морфология и са известни с високите си инвазивни свойства, което ги прави ценен модел за изучаване на метастазите и туморната инвазия. Те притежават няколко отличителни характеристики, включително наличието на липидни капчици в цитоплазмата и силна експресия на протеина муцин-1. Тези клетки също така експресират различни онкогени и тумор супресорни гени, които са от значение за патологията на рака на гърдата, като TP53 и RB1.

Клетъчната линия BT-549 е естроген-рецептор-отрицателна, прогестерон-рецептор-отрицателна и не амплифицира HER2, като по този начин се причислява към подтипа тройно отрицателен рак на гърдата (TNBC). Благодарение на тази класификация клетките BT-549 са особено полезни за изучаване на уникалните механизми на прогресия и отговор на лечение при TNBC, който е известен с агресивния си характер и липсата на целеви терапии.

Освен това клетките BT-549 често се използват в проучвания за лекарствена резистентност и за тестване на нови химиотерапевтични агенти и целеви терапии, като предлагат информация за потенциални терапевтични стратегии за управление и лечение на агресивни форми на рак на гърдата.

Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Дуктален
Синоними
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Кариотип
Режим = 74, диапазон = 53 до 140, три маркерни хромозоми

04Идентификатори

Източник
BT-549 (каталожен номер 300132 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1092

05Проява и предразположеност

Изоензими
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, продукт за честота на фенотипа: 0.0048
Мутационен профил
Мутация на TP53

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще дадат конфулентен слой за около 4 дни
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
72 години
Етническа принадлежност
Кавказки