Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα BT-549
Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Θέση μετάστασης
Πνευμονογαστρικός πόρος
Συνώνυμα
BT 549, BT.549, BT549

Έγγραφα

Κύτταρα BT-549

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300132

Τα κύτταρα BT-549 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του μαστού που προέρχεται από ιστό του μαστικού αδένα μιας 72χρονης γυναίκας καυκάσιας καταγωγής με πορογενές καρκίνωμα. Πρόκειται για...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα BT-549 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του μαστού που προέρχεται από τον ιστό του μαστικού αδένα μιας 72χρονης καυκάσιας γυναίκας με καρκίνωμα του πόρου. Χρησιμοποιούνται συνήθως στην έρευνα για τον καρκίνο για τη μελέτη της βιολογίας και της θεραπείας του καρκίνου του μαστού, ιδίως του τριπλά αρνητικού υποτύπου, ο οποίος στερείται έκφρασης του υποδοχέα οιστρογόνων, του υποδοχέα προγεστερόνης και του HER2.

Τα κύτταρα BT-549 χαρακτηρίζονται από την επιθηλιακή μορφολογία τους και είναι γνωστά για τις ιδιαίτερα διεισδυτικές τους ιδιότητες, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της μετάστασης και της εισβολής του όγκου. Παρουσιάζουν διάφορα διακριτικά χαρακτηριστικά, όπως η παρουσία σταγονιδίων λιπιδίων στο κυτταρόπλασμα και η ισχυρή έκφραση της πρωτεΐνης mucin-1. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν επίσης διάφορα ογκογονίδια και ογκοκατασταλτικά γονίδια που σχετίζονται με την παθολογία του καρκίνου του μαστού, όπως τα TP53 και RB1.

Η κυτταρική σειρά BT-549 είναι αρνητική σε υποδοχείς οιστρογόνων, αρνητική σε υποδοχείς προγεστερόνης και δεν ενισχύει το HER2, κατατάσσοντάς την έτσι στον υποτύπο του τριπλά αρνητικού καρκίνου του μαστού (TNBC). Λόγω αυτής της ταξινόμησης, τα κύτταρα BT-549 είναι ιδιαίτερα χρήσιμα για τη μελέτη των μοναδικών μηχανισμών εξέλιξης και θεραπευτικής ανταπόκρισης στον TNBC, ο οποίος είναι γνωστός για τον επιθετικό του χαρακτήρα και την έλλειψη στοχευμένων θεραπειών.

Επιπλέον, τα κύτταρα BT-549 χρησιμοποιούνται συχνά σε μελέτες ανθεκτικότητας στα φάρμακα και για τη δοκιμή νέων χημειοθεραπευτικών παραγόντων και στοχευμένων θεραπειών, προσφέροντας γνώσεις σχετικά με πιθανές θεραπευτικές στρατηγικές για τη διαχείριση και τη θεραπεία επιθετικών μορφών καρκίνου του μαστού.

Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Θέση μετάστασης
Πνευμονογαστρικός πόρος
Συνώνυμα
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Καρυότυπος
Τρόπος λειτουργίας = 74, εύρος = 53 έως 140, τρία χρωμοσώματα-δείκτες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
BT-549 (αριθμός καταλόγου Cytion 300132)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1092

05Έκφραση και ευαισθησία

Ισοένζυμα
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Προϊόν συχνότητας φαινοτύπων: 0.0048
Προφίλ μεταλλάξεων
TP53 mut

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2 θα αποδώσουν ένα συρρέον στρώμα σε περίπου 4 ημέρες
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
72 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος