Ga naar de inhoud
BT-549 cellen
Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
BT 549, BT.549, BT549

Documenten

BT-549 cellen

Cell line · Productnummer 300132

BT-549-cellen zijn een menselijke borstkankercellijn die is afgeleid van het borstklierweefsel van een 72-jarige blanke vrouw met ductaal carcinoom. Ze zijn co...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

BT-549 cellen zijn een menselijke borstkankercellijn afkomstig uit het borstklierweefsel van een 72-jarige Kaukasische vrouw met ductaal carcinoom. Ze worden vaak gebruikt in kankeronderzoek om de biologie en behandeling van borstkanker te bestuderen, in het bijzonder het triple-negatieve subtype, waarbij expressie van oestrogeenreceptor, progesteronreceptor en HER2 ontbreekt.

BT-549 cellen worden gekenmerkt door hun epitheliale morfologie en staan bekend om hun zeer invasieve eigenschappen, waardoor ze een waardevol model zijn voor het bestuderen van metastase en tumorinvasie. Ze vertonen verschillende kenmerkende eigenschappen, waaronder de aanwezigheid van lipidedruppels in het cytoplasma en een robuuste expressie van het mucine-1 eiwit. Deze cellen brengen ook verschillende oncogenen en tumorsuppressorgenen tot expressie die relevant zijn voor de pathologie van borstkanker, zoals TP53 en RB1.

De BT-549 cellijn is oestrogeenreceptornegatief, progesteronreceptornegatief en amplificeert HER2 niet, waardoor het onder het subtype van triple-negatieve borstkanker (TNBC) valt. Door deze classificatie zijn BT-549 cellen bijzonder nuttig voor het bestuderen van de unieke mechanismen van progressie en behandelingsrespons in TNBC, dat bekend staat om zijn agressieve aard en gebrek aan gerichte therapieën.

Bovendien worden BT-549 cellen vaak gebruikt in onderzoeken naar geneesmiddelenresistentie en voor het testen van nieuwe chemotherapeutische middelen en doelgerichte therapieën, waardoor inzicht wordt verkregen in potentiële therapeutische strategieën voor het beheer en de behandeling van agressieve vormen van borstkanker.

Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Karyotype
Modus = 74, bereik = 53 tot 140, drie markerchromosomen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
BT-549 (Cytion catalogusnummer 300132)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expressie en vatbaarheid

Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotype Frequentie Product: 0.0048
Mutatieprofiel
TP53 mutatie

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 4 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
72 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch