Zum Inhalt springen
BT-549-Zellen
Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Invasives duktales Karzinom
Metastasenherd
Duktal
Synonyme
BT 549, BT.549, BT549

Dokumente

BT-549-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300132

BT-549-Zellen sind eine menschliche Brustkrebszelllinie, die aus dem Brustdrüsengewebe einer 72-jährigen kaukasischen Frau mit duktalem Karzinom gewonnen wurde. Sie sind ko...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

BT-549-Zellen sind eine menschliche Brustkrebs-Zelllinie, die aus dem Brustdrüsengewebe einer 72-jährigen kaukasischen Frau mit duktalem Karzinom gewonnen wurde. Sie werden in der Krebsforschung häufig verwendet, um die Biologie und Behandlung von Brustkrebs zu untersuchen, insbesondere des dreifach negativen Subtyps, dem die Expression von Östrogenrezeptor, Progesteronrezeptor und HER2 fehlt.

BT-549-Zellen zeichnen sich durch ihre epitheliale Morphologie aus und sind für ihre stark invasiven Eigenschaften bekannt, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung von Metastasen und Tumorinvasion macht. Sie weisen mehrere charakteristische Merkmale auf, darunter das Vorhandensein von Lipidtröpfchen im Zytoplasma und eine starke Expression des Proteins Mucin-1. Diese Zellen exprimieren auch verschiedene Onkogene und Tumorsuppressorgene, die für die Pathologie von Brustkrebs relevant sind, wie TP53 und RB1.

Die Zelllinie BT-549 ist Östrogenrezeptor-negativ, Progesteronrezeptor-negativ und amplifiziert HER2 nicht, so dass sie dem Subtyp des dreifach-negativen Brustkrebses (TNBC) zugeordnet wird. Aufgrund dieser Klassifizierung eignen sich BT-549-Zellen besonders gut für die Untersuchung der einzigartigen Mechanismen der Progression und des Ansprechens auf eine Behandlung bei TNBC, das für seine Aggressivität und das Fehlen gezielter Therapien bekannt ist.

Darüber hinaus werden BT-549-Zellen häufig in Studien zur Medikamentenresistenz und zur Erprobung neuer Chemotherapeutika und zielgerichteter Therapien eingesetzt und bieten so Einblicke in potenzielle therapeutische Strategien für die Behandlung aggressiver Formen von Brustkrebs.

Gewebe
Brust, Brustdrüse
Krankheit
Invasives duktales Karzinom
Metastasenherd
Duktal
Synonyme
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Karyotyp
Modus = 74, Bereich = 53 bis 140, drei Markerchromosomen

04Bezeichner

Quellenangabe
BT-549 (Cytion-Katalognummer 300132)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0048
Mutationsprofil
TP53 mut

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 4 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
72 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch