Pāriet uz saturu
BT-549 šūnas
Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
BT 549, BT.549, BT549

Dokumenti

BT-549 šūnas

Cell line · Preces numurs 300132

BT-549 šūnas ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no 72 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes, kurai bija kanālu karcinoma, piena dziedzera audiem. Tās ir...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BT-549 šūnas ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no 72 gadus vecas baltādainas sievietes piena dziedzera audiem ar duktālo karcinomu. Tās parasti izmanto vēža pētījumos, lai pētītu krūts vēža bioloģiju un ārstēšanu, jo īpaši trīskārši negatīvo apakštipu, kam trūkst estrogēnu receptoru, progesterona receptoru un HER2 ekspresijas.

BT-549 šūnām ir raksturīga epitēlija morfoloģija, un tās ir pazīstamas ar savām ļoti invazīvajām īpašībām, padarot tās par vērtīgu modeli metastāžu un audzēja invazijas pētīšanai. Tām piemīt vairākas raksturīgas iezīmes, tostarp lipīdu pilienu klātbūtne citoplazmā un spēcīga mucīna-1 proteīna ekspresija. Šīs šūnas arī ekspresē dažādus onkogēnus un audzēja supresoru gēnus, kas ir svarīgi krūts vēža patoloģijai, piemēram, TP53 un RB1.

BT-549 šūnu līnija ir estrogēnu receptoru negatīva, progesterona receptoru negatīva un nespēj amplificēt HER2, tādējādi to iedala trīskārši negatīvā krūts vēža (TNBC) apakštipa kategorijā. Pateicoties šai klasifikācijai, BT-549 šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu unikālos progresēšanas un atbildes reakcijas uz ārstēšanu mehānismus TNBC, kas ir pazīstams ar savu agresīvo raksturu un mērķterapijas trūkumu.

Turklāt BT-549 šūnas bieži izmanto zāļu rezistences pētījumos un jaunu ķīmijterapeitisko līdzekļu un mērķterapiju testēšanā, sniedzot ieskatu potenciālajās terapeitiskajās stratēģijās agresīvu krūts vēža formu ārstēšanai un ārstēšanai.

Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Kariotips
Moduss = 74, diapazons = 53 līdz 140, trīs marķieru hromosomas

04Identifikatori

Atsauce
BT-549 (Cytion kataloga numurs 300132)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotipu biežuma produkts: 0.0048
Mutāciju profils
TP53 mutācija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
72 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis