HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

La lignée cellulaire HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 est un dérivé génétiquement modifié des cellules HeLa Kyoto, connues pour leur robustesse et leur large utilisation dans la recherche scientifique. Cette lignée cellulaire a été modifiée à l'aide de la technologie CRISPR-Cas9 pour exprimer la protéine fluorescente verte améliorée monomérique (mEGFP) étiquetée Nup358, un composant crucial du complexe du pore nucléaire (NPC). Nup358, également connu sous le nom de RanBP2, joue un rôle important dans le transport nucléocytoplasmique, l'assemblage du fuseau mitotique et d'autres processus cellulaires. L'étiquette mEGFP permet de visualiser Nup358, ce qui facilite l'observation en temps réel de sa dynamique et de ses interactions au sein de la cellule.

Les cellules HeLa Kyoto, une sous-lignée des cellules HeLa originales, se caractérisent par leur adaptabilité et leur croissance stable en culture. Le système CRISPR-Cas9 de cette lignée cellulaire permet une édition génomique précise, garantissant que l'étiquette mEGFP est fusionnée avec précision à la protéine Nup358 sans perturber sa fonction. Cela fait de la lignée cellulaire HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 un outil précieux pour l'étude des aspects structurels et fonctionnels du complexe du pore nucléaire. Les chercheurs peuvent utiliser cette lignée cellulaire pour mieux comprendre les mécanismes régissant le transport nucléocytoplasmique et le rôle de Nup358 dans l'homéostasie cellulaire et les états pathologiques, tels que le cancer et les infections virales.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie