HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

De HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 cellijn is een genetisch gemanipuleerde afgeleide van HeLa Kyoto cellen, bekend om hun robuustheid en wijdverbreid gebruik in wetenschappelijk onderzoek. Deze cellijn is gemodificeerd met CRISPR-Cas9-technologie om mEGFP (monomeric Enhanced Green Fluorescent Protein) gemerkt Nup358, een cruciaal onderdeel van het nucleaire poriëncomplex (NPC), tot expressie te brengen. Nup358, ook bekend als RanBP2, speelt een belangrijke rol in nucleocytoplasmatisch transport, de assemblage van mitotische spindels en andere cellulaire processen. De mEGFP tag maakt de visualisatie van Nup358 mogelijk, waardoor real-time observatie van de dynamiek en interacties binnen de cel mogelijk wordt.

HeLa Kyoto-cellen, een sublijn van de oorspronkelijke HeLa-cellen, worden gekenmerkt door hun aanpassingsvermogen en stabiele groei in cultuur. Het CRISPR-Cas9 systeem in deze cellijn maakt precieze genomische bewerking mogelijk en zorgt ervoor dat de mEGFP tag nauwkeurig met het Nup358 eiwit wordt versmolten zonder de functie ervan te verstoren. Dit maakt de HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 cellijn een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van de structurele en functionele aspecten van het nucleaire poriëncomplex. Onderzoekers kunnen deze cellijn gebruiken om inzicht te krijgen in de mechanismen die het nucleocytoplasmatisch transport regelen en de rol van Nup358 in cellulaire homeostase en ziektebeelden, zoals kanker en virale infecties.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring