HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

HK-CRISPR-mEGFP-Nup358細胞株は、HeLa京都細胞の遺伝子工学的誘導体であり、その頑健性と科学研究における広範な使用で知られている。この細胞株は、核膜孔複合体（NPC）の重要な構成要素であるmEGFP（単量体増強緑色蛍光タンパク質）タグ付きNup358を発現するよう、CRISPR-Cas9技術を用いて改変されている。Nup358はRanBP2としても知られ、核細胞質輸送、有糸分裂紡錘体の組み立て、その他の細胞プロセスにおいて重要な役割を果たしている。mEGFPタグはNup358の可視化を可能にし、細胞内での動態や相互作用をリアルタイムで観察することを容易にする。

HeLa京都細胞は、オリジナルのHeLa細胞のサブラインであり、培養における適応性と安定した増殖が特徴である。この細胞株のCRISPR-Cas9システムは正確なゲノム編集を可能にし、Nup358タンパク質の機能を破壊することなくmEGFPタグを正確に融合させる。このため、HK-CRISPR-mEGFP-Nup358細胞株は、核膜孔複合体の構造的・機能的側面を研究するための貴重なツールとなる。研究者たちはこの細胞株を用いて、核細胞質輸送を支配するメカニズムや、細胞の恒常性やがんやウイルス感染などの疾患状態におけるNup358の役割についての洞察を得ることができる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。