HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 šūnu līnija ir ģenētiski modificēts HeLa Kioto šūnu atvasinājums, kas ir pazīstams ar savu izturību un plašo lietojumu zinātniskajos pētījumos. Šī šūnu līnija ir modificēta, izmantojot CRISPR-Cas9 tehnoloģiju, lai ekspresētu mEGFP (monomēru uzlaboto zaļo fluorescējošo proteīnu) ar marķējumu Nup358, kas ir būtiska kodola poru kompleksa (NPC) sastāvdaļa. Nup358, kas pazīstams arī kā RanBP2, ir nozīmīga loma nukleocitoplazmas transportā, mitotiskās vārpstas montāžā un citos šūnu procesos. MEGFP marķējums ļauj vizualizēt Nup358, atvieglojot tā dinamikas un mijiedarbības novērošanu šūnā reāllaikā.

HeLa Kyoto šūnas, kas ir oriģinālo HeLa šūnu apakšlīnija, raksturo to pielāgošanās spēja un stabila augšana kultūrā. CRISPR-Cas9 sistēma šajā šūnu līnijā ļauj precīzi rediģēt genomu, nodrošinot, ka mEGFP marķējums ir precīzi savienots ar Nup358 proteīnu, netraucējot tā funkciju. Tas padara HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 šūnu līniju par vērtīgu instrumentu kodola poru kompleksa strukturālo un funkcionālo aspektu izpētei. Pētnieki var izmantot šo šūnu līniju, lai gūtu ieskatu mehānismos, kas regulē nukleocitoplazmas transportu, un Nup358 nozīmi šūnu homeostāzē un slimību, piemēram, vēža un vīrusu infekciju, gadījumos.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu