HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

Garis sel HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 adalah turunan rekayasa genetika dari sel HeLa Kyoto, yang dikenal karena ketangguhannya dan digunakan secara luas dalam penelitian ilmiah. Lini sel ini telah dimodifikasi menggunakan teknologi CRISPR-Cas9 untuk mengekspresikan mEGFP (monomer Enhanced Green Fluorescent Protein) yang ditandai dengan Nup358, komponen penting dari kompleks pori nuklir (NPC). Nup358, juga dikenal sebagai RanBP2, memainkan peran penting dalam transpor nukleositoplasma, perakitan spindel mitosis, dan proses seluler lainnya. Tag mEGFP memungkinkan visualisasi Nup358, memfasilitasi pengamatan waktu nyata dari dinamika dan interaksinya di dalam sel.

Sel HeLa Kyoto, subgalur dari sel HeLa asli, dicirikan oleh kemampuan beradaptasi dan pertumbuhan yang stabil dalam kultur. Sistem CRISPR-Cas9 dalam garis sel ini memungkinkan pengeditan genom yang tepat, memastikan tag mEGFP secara akurat menyatu dengan protein Nup358 tanpa mengganggu fungsinya. Hal ini menjadikan jalur sel HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 sebagai alat yang berharga untuk mempelajari aspek struktural dan fungsional dari kompleks pori nuklir. Para peneliti dapat menggunakan garis sel ini untuk mendapatkan wawasan tentang mekanisme yang mengatur transpor nukleositoplasma dan peran Nup358 dalam homeostasis seluler dan keadaan penyakit, seperti kanker dan infeksi virus.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami