HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

الخط الخلوي HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 هو خط خلوي مُعدّل وراثياً من خلايا هيلا كيوتو المعروفة بقوتها واستخدامها على نطاق واسع في البحث العلمي. وقد تم تعديل هذا الخط الخلوي باستخدام تقنية CRISPR-Cas9 للتعبير عن البروتين المتوهج الأخضر المحسّن أحادي اللون الموسوم بـ Nup358، وهو مكون أساسي في مجمع المسام النووية (NPC). ويؤدي Nup358، المعروف أيضاً باسم RanBP2، دوراً مهماً في النقل النووي للبلازمية وتجميع المغزل الانقسامي والعمليات الخلوية الأخرى. وتسمح علامة mEGFP بتصور Nup358، مما يسهل مراقبة ديناميكياتها وتفاعلاتها داخل الخلية في الوقت الفعلي.

تتميز خلايا HeLa Kyoto، وهي سلالة فرعية من خلايا HeLa الأصلية، بقدرتها على التكيف والنمو المستقر في المستنبت. ويتيح نظام CRISPR-Cas9 في هذا الخط الخلوي إمكانية التعديل الجيني الدقيق، مما يضمن دمج علامة mEGFP بدقة مع بروتين Nup358 دون تعطيل وظيفته. وهذا يجعل من الخط الخلوي HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 أداة قيّمة لدراسة الجوانب الهيكلية والوظيفية لمجمع المسام النووية. يمكن للباحثين استخدام هذا الخط الخلوي لاكتساب رؤى حول الآليات التي تحكم النقل النووي الخلوي ودور Nup358 في التوازن الخلوي والحالات المرضية، مثل السرطان والعدوى الفيروسية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان