HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

Die HK-CRISPR-mEGFP-Nup358-Zelllinie ist ein gentechnisch verändertes Derivat der HeLa-Kyoto-Zellen, die für ihre Robustheit und ihre breite Verwendung in der wissenschaftlichen Forschung bekannt sind. Diese Zelllinie wurde mit Hilfe der CRISPR-Cas9-Technologie so verändert, dass sie mEGFP (monomeres Enhanced Green Fluorescent Protein) markiertes Nup358, eine wichtige Komponente des Kernporenkomplexes (NPC), exprimiert. Nup358, auch bekannt als RanBP2, spielt eine wichtige Rolle beim nukleozytoplasmatischen Transport, beim Aufbau der mitotischen Spindel und bei anderen zellulären Prozessen. Der mEGFP-Tag ermöglicht die Visualisierung von Nup358 und erleichtert die Echtzeitbeobachtung seiner Dynamik und Interaktionen innerhalb der Zelle.

HeLa-Kyoto-Zellen, eine Unterlinie der ursprünglichen HeLa-Zellen, zeichnen sich durch ihre Anpassungsfähigkeit und ihr stabiles Wachstum in Kultur aus. Das CRISPR-Cas9-System in dieser Zelllinie ermöglicht ein präzises Genom-Editing und stellt sicher, dass der mEGFP-Tag genau an das Nup358-Protein fusioniert wird, ohne dessen Funktion zu beeinträchtigen. Dies macht die HK-CRISPR-mEGFP-Nup358-Zelllinie zu einem wertvollen Werkzeug für die Untersuchung der strukturellen und funktionellen Aspekte des Kernporenkomplexes. Forscher können diese Zelllinie nutzen, um Erkenntnisse über die Mechanismen des nukleozytoplasmatischen Transports und die Rolle von Nup358 in der zellulären Homöostase und bei Krankheiten wie Krebs und Virusinfektionen zu gewinnen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung