HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 세포주는 과학 연구에서 견고하고 광범위하게 사용되는 것으로 알려진 HeLa 교토 세포의 유전자 조작 파생물입니다. 이 세포주는 핵 기공 복합체(NPC)의 중요한 구성 요소인 Nup358이 태그된 mEGFP(단량체 강화 녹색 형광 단백질)를 발현하도록 CRISPR-Cas9 기술을 사용하여 변형되었습니다. RanBP2라고도 알려진 Nup358은 핵세포질 수송, 유사 분열 스핀들 조립 및 기타 세포 과정에서 중요한 역할을 합니다. MEGFP 태그를 사용하면 Nup358을 시각화할 수 있어 세포 내 역학 및 상호 작용을 실시간으로 관찰할 수 있습니다.

원래 HeLa 세포의 하위 라인인 HeLa 교토 세포는 적응성이 뛰어나고 배양에서 안정적으로 성장하는 것이 특징입니다. 이 세포주의 CRISPR-Cas9 시스템은 정밀한 게놈 편집을 가능하게 하여 mEGFP 태그가 기능을 방해하지 않고 Nup358 단백질에 정확하게 융합되도록 보장합니다. 따라서 HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 세포주는 핵 기공 복합체의 구조적 및 기능적 측면을 연구하는 데 유용한 도구가 될 수 있습니다. 연구자들은 이 세포주를 사용하여 핵세포질 수송을 관장하는 메커니즘과 암 및 바이러스 감염과 같은 세포 항상성 및 질병 상태에서의 Nup358의 역할에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다.

37°C, 5%_CO2, 습한 대기.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다

자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다