HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 hücre hattı, sağlamlığı ve bilimsel araştırmalarda yaygın kullanımı ile bilinen HeLa Kyoto hücrelerinin genetik olarak tasarlanmış bir türevidir. Bu hücre hattı, nükleer gözenek kompleksinin (NPC) önemli bir bileşeni olan mEGFP (monomerik Geliştirilmiş Yeşil Floresan Protein) etiketli Nup358'i ifade etmek için CRISPR-Cas9 teknolojisi kullanılarak modifiye edilmiştir. RanBP2 olarak da bilinen Nup358, nükleositoplazmik taşıma, mitotik iğ düzeneği ve diğer hücresel süreçlerde önemli bir rol oynar. MEGFP etiketi, Nup358'in görselleştirilmesine olanak tanıyarak hücre içindeki dinamiklerinin ve etkileşimlerinin gerçek zamanlı olarak gözlemlenmesini kolaylaştırır.

Orijinal HeLa hücrelerinin bir alt hattı olan HeLa Kyoto hücreleri, uyarlanabilirlikleri ve kültürde istikrarlı büyümeleri ile karakterize edilir. Bu hücre hattındaki CRISPR-Cas9 sistemi, mEGFP etiketinin işlevini bozmadan Nup358 proteinine doğru bir şekilde kaynaşmasını sağlayarak hassas genomik düzenleme sağlar. Bu da HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 hücre hattını nükleer gözenek kompleksinin yapısal ve işlevsel yönlerini incelemek için değerli bir araç haline getiriyor. Araştırmacılar bu hücre hattını, nükleositoplazmik taşınmayı yöneten mekanizmalar ve Nup358'in hücresel homeostaz ve kanser ve viral enfeksiyonlar gibi hastalık durumlarındaki rolü hakkında bilgi edinmek için kullanabilirler.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın