HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

Celična linija HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 je gensko spremenjen derivat celic HeLa Kyoto, ki so znane po svoji robustnosti in široki uporabi v znanstvenih raziskavah. Ta celična linija je bila spremenjena s tehnologijo CRISPR-Cas9 za izražanje mEGFP (monomernega izboljšanega zeleno fluorescentnega proteina), označenega z Nup358, ki je ključna sestavina kompleksa jedrnih por (NPC). Nup358, znan tudi pod imenom RanBP2, ima pomembno vlogo pri prenosu nukleocitoplazme, sestavljanju mitotičnega vretena in drugih celičnih procesih. Oznaka mEGFP omogoča vizualizacijo Nup358, kar olajša opazovanje njegove dinamike in interakcij v celici v realnem času.

Za celice HeLa Kyoto, podlinijo prvotnih celic HeLa, sta značilni prilagodljivost in stabilna rast v kulturi. Sistem CRISPR-Cas9 v tej celični liniji omogoča natančno urejanje genoma, kar zagotavlja, da je oznaka mEGFP natančno spojena z beljakovino Nup358, ne da bi pri tem motila njeno delovanje. Zato je celična linija HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 dragoceno orodje za preučevanje strukturnih in funkcionalnih vidikov kompleksa jedrnih por. Raziskovalci lahko s to celično linijo pridobijo vpogled v mehanizme, ki uravnavajo nukleocitoplazemski transport, in vlogo Nup358 v celični homeostazi in bolezenskih stanjih, kot so rak in virusne okužbe.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo