Ku 80-/-

Les cellules MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) Ku80-/- sont des cellules fibroblastiques génétiquement modifiées provenant de souris dépourvues du gène Ku80 (XRCC5). La protéine Ku80 forme, avec la protéine Ku70, l'hétérodimère Ku, qui est essentiel pour la voie de la jonction non homologue (NHEJ) de la réparation des cassures double brin de l'ADN (DSB). L'absence de Ku80 dans ces cellules réduit leur capacité à réparer efficacement les cassures double brin, ce qui en fait un modèle précieux pour étudier le rôle de la voie NHEJ dans la stabilité génomique, les mécanismes de réparation de l'ADN et la biologie du cancer.

Les cellules MEF Ku80-/- présentent une sensibilité accrue aux radiations ionisantes et à d'autres agents endommageant l'ADN en raison de leur capacité compromise de réparation des CDB. Ces cellules ont également tendance à accumuler des aberrations chromosomiques et à présenter une instabilité génomique. L'absence de Ku80 affecte non seulement la réparation de l'ADN mais aussi d'autres processus cellulaires tels que la recombinaison V(D)J, qui est cruciale pour le développement d'un répertoire diversifié d'anticorps et de récepteurs de cellules T dans le système immunitaire.

Les recherches menées sur les cellules MEF Ku80-/- ont permis de mieux comprendre les mécanismes moléculaires du NHEJ et les implications plus larges d'une réparation défectueuse de l'ADN. Ces études sont cruciales pour comprendre le développement du cancer et d'autres maladies associées à l'instabilité génomique. En outre, elles contribuent à l'exploration de cibles thérapeutiques potentielles pour améliorer la réparation de l'ADN dans les cellules cancéreuses, améliorant ainsi l'efficacité des traitements anticancéreux qui reposent sur l'induction de lésions de l'ADN dans les cellules tumorales.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie