Ku 80-/-

As células Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) são células de fibroblastos geneticamente modificadas derivadas de ratinhos que não possuem o gene Ku80 (XRCC5). A proteína Ku80, em conjunto com a Ku70, forma o heterodímero Ku, que é essencial para a via de ligação de extremidades não homólogas (NHEJ) da reparação da quebra de cadeia dupla do ADN (DSB). A ausência de Ku80 nestas células prejudica a sua capacidade de reparar eficazmente as DSB, tornando-as um modelo valioso para estudar o papel da via NHEJ na estabilidade genómica, nos mecanismos de reparação do ADN e na biologia do cancro.

As células MEF Ku80-/- apresentam uma sensibilidade acrescida à radiação ionizante e a outros agentes que danificam o ADN, devido ao comprometimento da sua capacidade de reparação de DSBs. Estas células tendem também a acumular aberrações cromossómicas e a apresentar instabilidade genómica. A falta de Ku80 afecta não só a reparação do ADN, mas também outros processos celulares, como a recombinação V(D)J, que é crucial para o desenvolvimento de um repertório diversificado de anticorpos e receptores de células T no sistema imunitário.

A investigação com células MEF Ku80-/- proporcionou conhecimentos significativos sobre os mecanismos moleculares da NHEJ e as implicações mais vastas da reparação defeituosa do ADN. Estes estudos são cruciais para compreender o desenvolvimento do cancro e de outras doenças associadas à instabilidade genómica. Além disso, ajudam a explorar potenciais alvos terapêuticos para melhorar a reparação do ADN nas células cancerosas, melhorando assim a eficácia dos tratamentos contra o cancro que se baseiam na indução de danos no ADN das células tumorais.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia