Ku 80-/-

Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) šūnas ir ģenētiski inženierijas ceļā iegūtas peļu fibroblastu šūnas, kurām trūkst Ku80 gēna (XRCC5). Ku80 proteīns kopā ar Ku70 veido Ku heterodimēru, kas ir būtisks DNS dubultās virknes pārrāvuma (DSB) remontam NHEJ (non-homologous end joining) ceļā. Ku80 trūkums šajās šūnās mazina to spēju efektīvi labot DSB, padarot tās par vērtīgu modeli NHEJ ceļa lomas izpētei genoma stabilitātē, DNS labošanas mehānismos un vēža bioloģijā.

Ku80-/- MEF šūnām ir paaugstināta jutība pret jonizējošo starojumu un citiem DNS bojājošiem aģentiem, jo ir traucēta DSB labošanas spēja. Šīm šūnām arī ir tendence uzkrāties hromosomu aberācijas un genoma nestabilitāte. Ku80 trūkums ietekmē ne tikai DNS labošanu, bet arī citus šūnu procesus, piemēram, V(D)J rekombināciju, kas ir būtiska daudzveidīga antivielu repertuāra un T-šūnu receptoru attīstībai imūnajā sistēmā.

Pētījumi, kuros izmantotas Ku80-/- MEF šūnas, ir snieguši būtisku ieskatu NHEJ molekulārajos mehānismos un plašākā nozīmē par bojātas DNS labošanas sekām. Šie pētījumi ir ļoti svarīgi, lai izprastu vēža un citu ar genoma nestabilitāti saistītu slimību attīstību. Turklāt tie palīdz izpētīt potenciālos terapeitiskos mērķus, lai uzlabotu DNS labošanu vēža šūnās, tādējādi uzlabojot to vēža ārstēšanas metožu efektivitāti, kuru pamatā ir DNS bojājumu izraisīšana audzēja šūnās.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu