Ku 80-/-

Las células MEF (fibroblastos embrionarios de ratón) Ku80-/- son células de fibroblastos genéticamente modificadas derivadas de ratones que carecen del gen Ku80 (XRCC5). La proteína Ku80, junto con Ku70, forma el heterodímero Ku, que es esencial para la vía de unión de extremos no homólogos (NHEJ) de la reparación de la rotura de doble cadena (DSB) del ADN. La ausencia de Ku80 en estas células merma su capacidad para reparar eficazmente las DSB, lo que las convierte en un modelo valioso para estudiar el papel de la vía NHEJ en la estabilidad genómica, los mecanismos de reparación del ADN y la biología del cáncer.

Las células MEF Ku80-/- muestran una mayor sensibilidad a la radiación ionizante y a otros agentes dañinos para el ADN debido a su capacidad comprometida de reparación de DSBs. Estas células también tienden a acumular aberraciones cromosómicas y presentan inestabilidad genómica. La falta de Ku80 no sólo afecta a la reparación del ADN, sino también a otros procesos celulares como la recombinación V(D)J, que es crucial para el desarrollo de un repertorio diverso de anticuerpos y receptores de células T en el sistema inmunitario.

La investigación con células MEF Ku80-/- ha aportado datos significativos sobre los mecanismos moleculares de NHEJ y las implicaciones más amplias de la reparación defectuosa del ADN. Estos estudios son cruciales para comprender el desarrollo del cáncer y otras enfermedades asociadas a la inestabilidad genómica. Además, ayudan a explorar posibles dianas terapéuticas para potenciar la reparación del ADN en células cancerosas, mejorando así la eficacia de los tratamientos contra el cáncer que se basan en inducir daños en el ADN de las células tumorales.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía