Ku 80-/-

Ku80-/- MEF-celler (Mouse Embryonic Fibroblast) er genmanipulerte fibroblastceller fra mus som mangler Ku80-genet (XRCC5). Ku80-proteinet danner sammen med Ku70 Ku-heterodimeren, som er essensiell for den ikke-homologe endeforbindelsen (NHEJ) ved reparasjon av DNA-dobbeltstrengbrudd (DSB). Fraværet av Ku80 i disse cellene svekker deres evne til å reparere DSBs effektivt, noe som gjør dem til en verdifull modell for å studere NHEJ-veiens rolle i genomisk stabilitet, DNA-reparasjonsmekanismer og kreftbiologi.

Ku80-/- MEF-celler viser økt følsomhet for ioniserende stråling og andre DNA-skadelige stoffer på grunn av deres svekkede evne til å reparere DSB. Disse cellene har også en tendens til å akkumulere kromosomavvik og utvise genomisk ustabilitet. Mangelen på Ku80 påvirker ikke bare DNA-reparasjon, men også andre cellulære prosesser som V(D)J-rekombinasjon, som er avgjørende for utviklingen av et mangfoldig repertoar av antistoffer og T-cellereseptorer i immunsystemet.

Forskning på Ku80-/- MEF-celler har gitt oss betydelig innsikt i de molekylære mekanismene bak NHEJ og de mer generelle konsekvensene av mangelfull DNA-reparasjon. Disse studiene er avgjørende for å forstå utviklingen av kreft og andre sykdommer som er forbundet med genomisk ustabilitet. I tillegg bidrar de til å utforske potensielle terapeutiske mål for å forbedre DNA-reparasjon i kreftceller, og dermed forbedre effekten av kreftbehandlinger som baserer seg på å indusere DNA-skader i tumorceller.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring