Ku 80-/-

Ku80-/- MEF (mišji embrionalni fibroblast) so gensko spremenjene fibroblastne celice, pridobljene iz miši, ki nimajo gena Ku80 (XRCC5). Beljakovina Ku80 skupaj s Ku70 tvori heterodimer Ku, ki je bistven za pot NHEJ (non-homologous end joining) pri popravljanju dvojnih prekinitev verig DNK (DSB). Odsotnost Ku80 v teh celicah zmanjšuje njihovo sposobnost učinkovitega popravljanja DSB, zato so dragocen model za preučevanje vloge poti NHEJ pri stabilnosti genoma, mehanizmih popravljanja DNK in biologiji raka.

Ku80-/- MEF celice kažejo večjo občutljivost na ionizirajoče sevanje in druge dejavnike, ki poškodujejo DNK, zaradi oslabljene sposobnosti popravljanja DSB. Te celice tudi kopičijo kromosomske aberacije in kažejo genomsko nestabilnost. Pomanjkanje Ku80 ne vpliva le na popravljanje DNK, temveč tudi na druge celične procese, kot je rekombinacija V(D)J, ki je ključna za razvoj raznolikega repertoarja protiteles in celičnih receptorjev T v imunskem sistemu.

Raziskave z uporabo Ku80-/- MEF celic so omogočile pomemben vpogled v molekularne mehanizme NHEJ in širše posledice okvar pri popravljanju DNK. Te študije so ključne za razumevanje razvoja raka in drugih bolezni, povezanih z genomsko nestabilnostjo. Poleg tega pomagajo pri raziskovanju potencialnih terapevtskih ciljev za izboljšanje popravljanja DNK v rakavih celicah, s čimer se izboljša učinkovitost zdravljenja raka, ki temelji na povzročanju poškodb DNK v tumorskih celicah.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo