Ku 80-/-

Komórki Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) to genetycznie zmodyfikowane komórki fibroblastów pochodzące od myszy, którym brakuje genu Ku80 (XRCC5). Białko Ku80, w połączeniu z Ku70, tworzy heterodimer Ku, który jest niezbędny dla szlaku niehomologicznego łączenia końców (NHEJ) naprawy podwójnych pęknięć nici DNA (DSB). Brak Ku80 w tych komórkach upośledza ich zdolność do skutecznej naprawy DSB, co czyni je cennym modelem do badania roli szlaku NHEJ w stabilności genomu, mechanizmach naprawy DNA i biologii raka.

Komórki MEF Ku80-/- wykazują zwiększoną wrażliwość na promieniowanie jonizujące i inne czynniki uszkadzające DNA ze względu na ich upośledzoną zdolność naprawy DSB. Komórki te mają również tendencję do gromadzenia aberracji chromosomalnych i wykazują niestabilność genomową. Brak Ku80 wpływa nie tylko na naprawę DNA, ale także na inne procesy komórkowe, takie jak rekombinacja V(D)J, która ma kluczowe znaczenie dla rozwoju zróżnicowanego repertuaru przeciwciał i receptorów komórek T w układzie odpornościowym.

Badania z wykorzystaniem komórek Ku80-/- MEF dostarczyły znaczącego wglądu w molekularne mechanizmy NHEJ i szersze implikacje wadliwej naprawy DNA. Badania te mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia rozwoju raka i innych chorób związanych z niestabilnością genomu. Dodatkowo, pomagają one w badaniu potencjalnych celów terapeutycznych w celu zwiększenia naprawy DNA w komórkach nowotworowych, poprawiając tym samym skuteczność leczenia raka, które opiera się na indukowaniu uszkodzeń DNA w komórkach nowotworowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym