Ku 80-/-

Ku80-/- MEF-cellen (Mouse Embryonic Fibroblast) zijn genetisch gemanipuleerde fibroblastcellen afkomstig van muizen die het Ku80-gen (XRCC5) missen. Het Ku80 eiwit vormt samen met Ku70 de Ku heterodimer, die essentieel is voor de non-homologous end joining (NHEJ) route van DNA dubbelstrengsbreuk (DSB) reparatie. De afwezigheid van Ku80 in deze cellen vermindert hun vermogen om DSB's effectief te repareren, waardoor ze een waardevol model zijn voor het bestuderen van de rol van de NHEJ pathway in genomische stabiliteit, DNA-herstelmechanismen en kankerbiologie.

Ku80-/- MEF-cellen vertonen een verhoogde gevoeligheid voor ioniserende straling en andere DNA-beschadigende stoffen vanwege hun gecompromitteerde DSB-herstelcapaciteit. Deze cellen hebben ook de neiging om chromosoomafwijkingen te accumuleren en vertonen genomische instabiliteit. Het gebrek aan Ku80 beïnvloedt niet alleen DNA-herstel, maar ook andere cellulaire processen zoals V(D)J recombinatie, wat cruciaal is voor de ontwikkeling van een divers repertoire aan antilichamen en T-celreceptoren in het immuunsysteem.

Onderzoek met Ku80-/- MEF-cellen heeft belangrijke inzichten opgeleverd in de moleculaire mechanismen van NHEJ en de bredere implicaties van defect DNA-herstel. Deze studies zijn cruciaal voor het begrijpen van de ontwikkeling van kanker en andere ziekten die geassocieerd worden met genomische instabiliteit. Daarnaast helpen ze bij de verkenning van potentiële therapeutische doelen voor het verbeteren van DNA-herstel in kankercellen, waardoor de effectiviteit van kankerbehandelingen die afhankelijk zijn van het induceren van DNA-schade in tumorcellen wordt verbeterd.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring