Ku 80-/-

Ku80-/- MEF (миши ембрионален фибробласт) клетките са генетично модифицирани фибробластни клетки, получени от мишки, при които липсва генът Ku80 (XRCC5). Протеинът Ku80, заедно с Ku70, образува хетеродимер Ku, който е от съществено значение за пътя на NHEJ (non-homologous end joining) на поправката на двойно-верижни скъсвания на ДНК (DSB). Липсата на Ku80 в тези клетки нарушава способността им ефективно да поправят DSB, което ги прави ценен модел за изучаване на ролята на пътя NHEJ в геномната стабилност, механизмите за поправка на ДНК и биологията на рака.

Ku80-/- MEF клетките проявяват повишена чувствителност към йонизиращо лъчение и други ДНК увреждащи агенти поради нарушената им способност за възстановяване на DSB. Тези клетки също така са склонни да натрупват хромозомни аберации и да проявяват геномна нестабилност. Липсата на Ku80 влияе не само върху възстановяването на ДНК, но и върху други клетъчни процеси като V(D)J рекомбинацията, която е от решаващо значение за развитието на разнообразен репертоар от антитела и Т-клетъчни рецептори в имунната система.

Изследванията, в които се използват Ku80-/- MEF клетки, предоставиха значителен поглед върху молекулярните механизми на NHEJ и по-широките последици от дефектното възстановяване на ДНК. Тези изследвания са от решаващо значение за разбирането на развитието на рака и други заболявания, свързани с геномна нестабилност. Освен това те спомагат за проучването на потенциални терапевтични цели за подобряване на възстановяването на ДНК в раковите клетки, като по този начин се подобрява ефикасността на лечението на рака, което разчита на предизвикване на увреждане на ДНК в туморните клетки.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация