Ku 80-/-

เซลล์ Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) เป็นเซลล์ไฟโบรบลาสต์ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมซึ่งได้มาจากหนูที่ขาดยีน Ku80 (XRCC5)โปรตีน Ku80 ร่วมกับ Ku70 สร้างเป็นเฮเทอโรไดเมอร์ Ku ซึ่งมีความจำเป็นสำหรับกระบวนการเชื่อมต่อปลายสายดีเอ็นเอที่ไม่เหมือนกัน (NHEJ) ของการซ่อมแซมดีเอ็นเอที่ขาดสายคู่ (DSB) การขาด Ku80 ในเซลล์เหล่านี้ทำให้ความสามารถในการซ่อมแซม DSB ได้อย่างมีประสิทธิภาพลดลง ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาบทบาทของเส้นทาง NHEJ ในความเสถียรของจีโนม กลไกการซ่อมแซมดีเอ็นเอ และชีววิทยาของมะเร็ง

เซลล์ MEF ที่ขาด Ku80-/- แสดงความไวต่อรังสีไอออไนซิ่งและสารทำลายดีเอ็นเออื่นๆ เพิ่มขึ้นเนื่องจากความสามารถในการซ่อมแซม DSB ที่บกพร่อง เซลล์เหล่านี้ยังมีแนวโน้มที่จะสะสมความผิดปกติของโครโมโซมและแสดงภาวะไม่เสถียรทางจีโนม การขาด Ku80 ส่งผลกระทบไม่เพียงแต่การซ่อมแซมดีเอ็นเอเท่านั้น แต่ยังส่งผลต่อกระบวนการอื่นๆ ของเซลล์ เช่น การรวมตัวกันของ V(D)J ซึ่งมีความสำคัญต่อการพัฒนาคลังแอนติบอดีและตัวรับเซลล์ T ที่หลากหลายในระบบภูมิคุ้มกัน

การวิจัยโดยใช้เซลล์ MEF ที่ขาด Ku80-/- ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับกลไกโมเลกุลของ NHEJ และผลกระทบที่กว้างขึ้นของการซ่อมแซม DNA ที่บกพร่อง การศึกษานี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจการพัฒนาของมะเร็งและโรคอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับความไม่เสถียรของจีโนม นอกจากนี้ยังช่วยในการสำรวจเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการซ่อมแซม DNA ในเซลล์มะเร็ง ซึ่งจะช่วยปรับปรุงประสิทธิภาพของการรักษาโรคมะเร็งที่อาศัยการทำให้เกิดความเสียหายต่อ DNA ในเซลล์เนื้องอก

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.