Ku 80-/-

Ku80-/- MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）细胞是经过基因工程改造的成纤维细胞，它们来自缺乏 Ku80 基因（XRCC5）的小鼠。Ku80蛋白与Ku70共同组成Ku异源二聚体，对于DNA双链断裂（DSB）修复的非同源末端连接（NHEJ）途径至关重要。这些细胞中缺少Ku80会削弱它们有效修复DSB的能力，从而使它们成为研究NHEJ途径在基因组稳定性、DNA修复机制和癌症生物学中的作用的宝贵模型。

Ku80-/- MEF细胞由于DSB修复能力受损，对电离辐射和其他DNA损伤剂的敏感性增加。这些细胞还容易积累染色体畸变，表现出基因组不稳定性。缺少 Ku80 不仅会影响 DNA 修复，还会影响 V(D)J 重组等其他细胞过程，而 V(D)J 重组对免疫系统中抗体和 T 细胞受体的多样化发展至关重要。

利用 Ku80-/- MEF 细胞进行的研究为了解 NHEJ 的分子机制以及 DNA 修复缺陷的广泛影响提供了重要启示。这些研究对于了解癌症和其他与基因组不稳定性有关的疾病的发展至关重要。此外，这些研究还有助于探索潜在的治疗靶点，以增强癌细胞的 DNA 修复能力，从而提高依赖诱导肿瘤细胞 DNA 损伤的癌症治疗效果。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。