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티슈
Embryo
질병
정상 마우스 배아 섬유아세포 (Ku80/XRCC5 녹아웃; SV40 불멸화; NHEJ 결핍)
전이 부위
해당 사항 없음 (불멸화된 MEF; 임상 종양 검체가 아님)
동의어
Ku80-/- MEF

문서

Ku 80-/-

Cell line · 제품 번호 305258

€550.00세금 및 배송비 별도

사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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  • CoA
1

01일반 정보

설명

Ku80-/- MEF(마우스 배아 섬유아세포) 세포는 Ku80 유전자(XRCC5)가 결여된 생쥐에서 유래한 유전자 조작 섬유아세포입니다. Ku80 단백질은 Ku70과 함께 DNA 이중 가닥 끊김(DSB) 복구의 비동일 말단 결합(NHEJ) 경로에 필수적인 Ku 이종이합체를 형성합니다. 이 세포에 Ku80이 없으면 DSB를 효과적으로 복구하는 능력이 손상되어 게놈 안정성, DNA 복구 메커니즘 및 암 생물학에서 NHEJ 경로의 역할을 연구하는 데 유용한 모델이 됩니다.

Ku80-/- MEF 세포는 손상된 DSB 복구 능력으로 인해 이온화 방사선 및 기타 DNA 손상 물질에 대한 민감도가 증가합니다. 또한 이러한 세포는 염색체 이상을 축적하고 게놈 불안정성을 보이는 경향이 있습니다. Ku80의 결핍은 DNA 복구뿐만 아니라 면역계에서 다양한 항체 및 T세포 수용체의 개발에 중요한 V(D)J 재조합과 같은 다른 세포 과정에도 영향을 미칩니다.

Ku80-/- MEF 세포를 이용한 연구는 NHEJ의 분자 메커니즘과 결함 있는 DNA 복구의 광범위한 의미에 대한 중요한 통찰력을 제공했습니다. 이러한 연구는 유전체 불안정성과 관련된 암 및 기타 질병의 발병을 이해하는 데 매우 중요합니다. 또한 암세포의 DNA 복구를 강화하기 위한 잠재적 치료 표적을 탐색하여 종양 세포의 DNA 손상 유도에 의존하는 암 치료의 효능을 개선하는 데 도움이 됩니다.

티슈
Embryo
질병
정상 마우스 배아 섬유아세포 (Ku80/XRCC5 녹아웃; SV40 불멸화; NHEJ 결핍)
전이 부위
해당 사항 없음 (불멸화된 MEF; 임상 종양 검체가 아님)
응용 분야
NHEJ DNA 복구 연구; Ku80/XRCC5 기능; DNA 이중가닥 절단(DSB) 복구; 유전체 불안정성 모델링; 방사선 민감도; V(D)J 재조합; 암 생물학; 유전독성 시험; DNA 손상 반응
동의어
  • Ku80-/- MEF

02분류

생물체
마우스
성
미지정
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This MEF line carries homozygous Ku80 (XRCC5) knockout and SV40 large T antigen immortalization. The SV40 transgene is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
2

03특징

형태학
섬유아세포 유사
세포 유형
섬유아세포

04식별자

인용
Ku 80-/- (사이티온 카탈로그 번호 305258)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_UJ16

05발현 및 감수성

돌연변이 프로파일
돌연변이 Ku80-/-
바이러스
형질 전환: 시미안 바이러스 40(SV40)

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
해동 및 배양

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
태아 12~13일
민족
해당 없음 (마우스 세포주)