Ku 80-/-

Le cellule MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) Ku80-/- sono cellule fibroblastiche geneticamente modificate derivate da topi che mancano del gene Ku80 (XRCC5). La proteina Ku80, insieme a Ku70, forma l'eterodimero Ku, che è essenziale per la via di riparazione della rottura del doppio filamento del DNA (DSB) attraverso la giunzione non omologa (NHEJ). L'assenza di Ku80 in queste cellule compromette la loro capacità di riparare efficacemente le DSB, rendendole un modello prezioso per studiare il ruolo della via NHEJ nella stabilità genomica, nei meccanismi di riparazione del DNA e nella biologia del cancro.

Le cellule MEF Ku80-/- mostrano una maggiore sensibilità alle radiazioni ionizzanti e ad altri agenti dannosi per il DNA, a causa della compromessa capacità di riparazione delle DSB. Queste cellule tendono inoltre ad accumulare aberrazioni cromosomiche e a presentare instabilità genomica. La mancanza di Ku80 influisce non solo sulla riparazione del DNA, ma anche su altri processi cellulari come la ricombinazione V(D)J, fondamentale per lo sviluppo di un repertorio diversificato di anticorpi e recettori delle cellule T nel sistema immunitario.

Le ricerche condotte su cellule MEF Ku80-/- hanno fornito importanti indicazioni sui meccanismi molecolari di NHEJ e sulle implicazioni più ampie della riparazione difettosa del DNA. Questi studi sono fondamentali per comprendere lo sviluppo del cancro e di altre malattie associate all'instabilità genomica. Inoltre, contribuiscono all'esplorazione di potenziali bersagli terapeutici per potenziare la riparazione del DNA nelle cellule tumorali, migliorando così l'efficacia dei trattamenti antitumorali che si basano sull'induzione di danni al DNA nelle cellule tumorali.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia