Ku 80-/-

Les cellules MEF (fibroblastes embryonnaires de souris) Ku80-/- sont des fibroblastes génétiquement modifiés dérivés de souris dépourvues du gène Ku80 (XRCC5). La protéine Ku80, en association avec la protéine Ku70, forme l’hétérodimère Ku, qui est essentiel à la voie de jonction des extrémités non homologues (NHEJ) impliquée dans la réparation des cassures double brin (DSB) de l’ADN. L’absence de Ku80 dans ces cellules altère leur capacité à réparer efficacement les DSB, ce qui en fait un modèle précieux pour l’étude du rôle de la voie NHEJ dans la stabilité génomique, les mécanismes de réparation de l’ADN et la biologie du cancer.

Les cellules MEF Ku80-/- présentent une sensibilité accrue aux rayonnements ionisants et à d’autres agents endommageant l’ADN en raison de leur capacité de réparation des DSB compromise. Ces cellules ont également tendance à accumuler des aberrations chromosomiques et à présenter une instabilité génomique. L’absence de Ku80 affecte non seulement la réparation de l’ADN, mais aussi d’autres processus cellulaires tels que la recombinaison V(D)J, qui est cruciale pour le développement d’un répertoire diversifié d’anticorps et de récepteurs des cellules T au sein du système immunitaire.

Les recherches menées à l’aide de cellules MEF Ku80-/- ont apporté des éclairages importants sur les mécanismes moléculaires de la NHEJ et sur les implications plus larges d’une réparation défectueuse de l’ADN. Ces études sont essentielles pour comprendre le développement du cancer et d’autres maladies associées à l’instabilité génomique. De plus, elles contribuent à l’exploration de cibles thérapeutiques potentielles visant à renforcer la réparation de l’ADN dans les cellules cancéreuses, améliorant ainsi l’efficacité des traitements anticancéreux qui reposent sur l’induction de dommages à l’ADN dans les cellules tumorales.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.