Ku 80-/-

Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) jsou geneticky upravené fibroblastové buňky odvozené od myší, které postrádají gen Ku80 (XRCC5). Protein Ku80 spolu s Ku70 tvoří heterodimer Ku, který je nezbytný pro cestu NHEJ (non-homologous end joining) při opravě dvouřetězcových zlomů DNA (DSB). Absence Ku80 v těchto buňkách zhoršuje jejich schopnost účinně opravovat DSB, což z nich činí cenný model pro studium úlohy dráhy NHEJ v genomové stabilitě, mechanismech oprav DNA a biologii rakoviny.

Ku80-/- MEF buňky vykazují zvýšenou citlivost vůči ionizujícímu záření a dalším látkám poškozujícím DNA v důsledku zhoršené schopnosti opravovat DSB. Tyto buňky mají také tendenci hromadit chromozomální aberace a vykazují genomickou nestabilitu. Nedostatek Ku80 ovlivňuje nejen opravu DNA, ale také další buněčné procesy, jako je V(D)J rekombinace, která je klíčová pro vývoj rozmanitého repertoáru protilátek a T-buněčných receptorů v imunitním systému.

Výzkum s použitím Ku80-/- MEF buněk přinesl významné poznatky o molekulárních mechanismech NHEJ a širších důsledcích defektní opravy DNA. Tyto studie mají zásadní význam pro pochopení vývoje rakoviny a dalších onemocnění spojených s genomovou nestabilitou. Kromě toho pomáhají při zkoumání potenciálních terapeutických cílů pro zlepšení oprav DNA v nádorových buňkách, a tím i zlepšení účinnosti léčby rakoviny, která je založena na vyvolání poškození DNA v nádorových buňkách.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení