Ku 80-/-

Τα κύτταρα Ku80-/- MEF (Mouse Embryonic Fibroblast) είναι γενετικά τροποποιημένα ινοβλαστικά κύτταρα που προέρχονται από ποντίκια από τα οποία λείπει το γονίδιο Ku80 (XRCC5). Η πρωτεΐνη Ku80, σε συνδυασμό με την Ku70, σχηματίζει το ετεροδιμερές Ku, το οποίο είναι απαραίτητο για το μονοπάτι της επιδιόρθωσης των σπασιμάτων διπλής έλικας (DSB) του DNA που δεν είναι ομόλογα συνδεδεμένα (NHEJ). Η απουσία της Ku80 σε αυτά τα κύτταρα μειώνει την ικανότητά τους να επιδιορθώνουν αποτελεσματικά τα DSBs, καθιστώντας τα ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη του ρόλου του μονοπατιού NHEJ στη γονιδιωματική σταθερότητα, τους μηχανισμούς επιδιόρθωσης του DNA και τη βιολογία του καρκίνου.

Τα κύτταρα Ku80-/- MEF παρουσιάζουν αυξημένη ευαισθησία στην ιονίζουσα ακτινοβολία και σε άλλους παράγοντες που βλάπτουν το DNA λόγω της μειωμένης ικανότητας επιδιόρθωσης DSB. Αυτά τα κύτταρα τείνουν επίσης να συσσωρεύουν χρωμοσωμικές ανωμαλίες και να εμφανίζουν γονιδιωματική αστάθεια. Η έλλειψη του Ku80 επηρεάζει όχι μόνο την επιδιόρθωση του DNA αλλά και άλλες κυτταρικές διεργασίες όπως ο ανασυνδυασμός V(D)J, ο οποίος είναι ζωτικής σημασίας για την ανάπτυξη ενός ποικίλου ρεπερτορίου αντισωμάτων και υποδοχέων Τ-κυττάρων στο ανοσοποιητικό σύστημα.

Η έρευνα με τη χρήση κυττάρων Ku80/- MEF παρείχε σημαντικές πληροφορίες για τους μοριακούς μηχανισμούς της NHEJ και τις ευρύτερες επιπτώσεις της ελαττωματικής επιδιόρθωσης του DNA. Οι μελέτες αυτές είναι ζωτικής σημασίας για την κατανόηση της ανάπτυξης του καρκίνου και άλλων ασθενειών που σχετίζονται με γονιδιωματική αστάθεια. Επιπλέον, βοηθούν στη διερεύνηση πιθανών θεραπευτικών στόχων για την ενίσχυση της επιδιόρθωσης του DNA στα καρκινικά κύτταρα, βελτιώνοντας έτσι την αποτελεσματικότητα των θεραπειών του καρκίνου που βασίζονται στην πρόκληση βλάβης του DNA στα καρκινικά κύτταρα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης