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Cellules NCI-H146
Tissu
Poumon
Maladie
Carcinome à petites cellules
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
H146, H-146, NCIH146

Documents

Cellules NCI-H146

Cell line · Référence du produit 300182

La lignée cellulaire NCI-H146 a été isolée par A.F. Gazdar et ses collaborateurs en 1979 à partir du liquide pleural d'un patient atteint d'un cancer du poumon à petites cellules. La moelle osseuse...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description
La lignée cellulaire NCI-H146 a été dérivée par A.F. Gazdar et ses collaborateurs en 1979 à partir du liquide pleural d'un patient atteint d'un cancer du poumon à petites cellules. L'échantillon de moelle osseuse a été prélevé avant le traitement.
Tissu
Poumon
Maladie
Carcinome à petites cellules
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Forme des tumeurs transplantables chez des souris nude qui ressemblent histologiquement aux cellules tumorales de l'échantillon de biopsie original
Statut de ploïdie
Aneuploïde
État du MSI
Stable (MSS)
Caryotype
Il s'agit d'une lignée cellulaire humaine quasi triploïde. Le nombre modal de chromosomes est de 68, mais des cellules avec 66, 70 et 71 chromosomes sont également fréquentes. Les chromosomes X sont appariés et aucun chromosome Y n'a été détecté dans les préparations colorées au QM.

04Identifiants

Référence
NCI-H146 (numéro de catalogue Cytion 300182)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Récepteur du facteur de croissance analogue à l'insuline II (IGF II)
Expression des protéines
Les cellules présentent une coloration positive pour la vimentine et la kératine, mais une coloration négative pour la protéine triplet du neurofilament.
Expression des antigènes
La lignée exprime des niveaux élevés de quatre marqueurs biochimiques : l'énolase spécifique des neurones, l'isoenzyme cérébrale de la créatine kinase, la L-DOPA décarboxylase et l'immunoréactivité de type bombesine
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produit de fréquence du phénotype = 0,0009
Produits
Les cellules produisent des quantités relativement élevées d'ARNm c-myc, mais les séquences d'ADN c-myc ne sont pas amplifiées. Les cellules n'expriment pas la vasopressine, l'ocytocine ou le peptide libérateur de gastrine.

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Repiquage
Les cellules doivent être sous-cultivées en transférant une partie de la suspension dans de nouveaux flacons de culture cellulaire remplis de milieu frais. Les amas peuvent également être recueillis par centrifugation et remis en suspension dans du milieu frais.
Densité de semis
1 à 2 x 105 cellules/ml
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, laisser les cellules se remettre du processus de congélation pendant au moins 24 à 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
59 ans
Origine ethnique
Caucasien