Ga naar de inhoud
NCI-H146-cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Kleincellig carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
H146, H-146, NCIH146

Documenten

NCI-H146-cellen

Cell line · Productnummer 300182

De NCI-H146-cellijn werd in 1979 door A.F. Gazdar en zijn medewerkers geïsoleerd uit het pleuravocht van een patiënt met kleincellige longkanker. Het beenmerg...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
De NCI-H146 cellijn werd in 1979 door A.F. Gazdar en medewerkers afgeleid uit het pleuravocht van een patiënt met kleincellige longkanker. Het beenmergmonster werd voorafgaand aan de therapie genomen.
Weefsel
Long
Ziekte
Kleincellig carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Beenmerg
Synoniemen
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Vormt transplanteerbare tumoren in naaktmuizen die histologisch lijken op tumorcellen van het oorspronkelijke biopsiemonster
Ploïdie
Aneuploïde
MSI-status
Stabiel (MSS)
Karyotype
Dit is een bijna triploïde menselijke cellijn. Het modale chromosoomnummer is 68, maar cellen met 66, 70 en 71 chromosomen kwamen ook vaak voor. De x-chromosomen waren gepaard en er werd geen Y-chromosoom gedetecteerd in QM-gekleurde preparaten.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H146 (Cytion catalogusnummer 300182)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Receptor voor insuline-achtige groeifactor II (IGF II)
Eiwit-expressie
De cellen zijn positief gekleurd voor vimentine en keratine, maar negatief voor neurofilament triplet proteïne.
Antigeenexpressie
De lijn brengt verhoogde niveaus van vier biochemische markers tot expressie: neuron specifieke enolase, hersenisoenzym van creatinekinase, L-DOPA decarboxylase en bombesine-achtige immunoreactiviteit
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotype Frequentie Product = 0,0009
Producten
De cellen produceren relatief grote hoeveelheden c-myc mRNA, maar c-myc DNA-sequenties worden niet geamplificeerd. De cellen brengen geen vasopressine, oxytocine of gastrine releasing peptide tot expressie.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Heruitplanten
De cellen moeten worden gesubcultiveerd door een deel van de suspensie over te brengen in nieuwe celkweekflesjes die vooraf gevuld zijn met vers medium. Als alternatief kunnen de clusters worden verzameld door centrifugeren en opnieuw gesuspendeerd in vers medium.
Zaaidichtheid
1 tot 2 x 105 cellen/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen na het ontdooien minstens 24 tot 48 uur bijkomen van het vriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
59 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch