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Células NCI-H146
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
H146, H-146, NCIH146

Documentos

Células NCI-H146

Cell line · Número de producto 300182

La línea celular NCI-H146 fue obtenida por A. F. Gazdar y sus colaboradores en 1979 a partir del líquido pleural de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La médula ósea...

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Personalización / Recomendaciones

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Lote
Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción
La línea celular NCI-H146 fue derivada por A.F. Gazdar y asociados en 1979 a partir del líquido pleural de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La muestra de médula ósea se tomó antes de la terapia.
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Forma tumores transplantables en ratones desnudos que histológicamente se asemejan a las células tumorales de la muestra de biopsia original
Estado de ploidía
Aneuploide
Estado de MSI
Estable (MSS)
Cariotipo
Se trata de una línea celular humana casi triploide. El número modal de cromosomas es 68, pero también son frecuentes las células con 66, 70 y 71 cromosomas. Los cromosomas x estaban emparejados y no se detectó ningún cromosoma Y en las preparaciones teñidas con QM.

04Identificadores

Referencia
NCI-H146 (número de catálogo de Cytion 300182)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Receptor del factor de crecimiento similar a la insulina II (IGF II)
Expresión de proteínas
Las células se tiñen positivamente para la vimentina y la queratina, pero son negativas para la proteína triplete de neurofilamentos.
Expresión de antígenos
La línea expresa niveles elevados de cuatro marcadores bioquímicos: enolasa neuronal específica, isoenzima cerebral de la creatina quinasa, L-DOPA descarboxilasa e inmunorreactividad similar a la bombesina
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Frecuencia del fenotipo Producto = 0,0009
Productos
Las células producen cantidades relativamente elevadas de ARNm de c-myc, pero las secuencias de ADN de c-myc no se amplifican. Las células no expresan vasopresina, oxitocina ni péptido liberador de gastrina.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS inactivado por calor
Subcultivo
Las células deben subcultivarse transfiriendo parte de la suspensión a nuevos matraces de cultivo celular precargados con medio fresco. Alternativamente, los grupos pueden recogerse por centrifugación y resuspenderse en medio fresco.
Densidad de siembra
1 a 2 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, deje que las células se recuperen del proceso de congelación durante al menos 24 a 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
59 años
Origen étnico
Caucásico