Prejsť na obsah
Bunky NCI-H146
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
H146, H-146, NCIH146

Dokumenty

Bunky NCI-H146

Cell line · Číslo výrobku 300182

Buněčná línia NCI-H146 bola izolovaná A. F. Gazdarom a spolupracovníkmi v roku 1979 z pleurálnej tekutiny pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Kostná dreň...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Bunkovú líniu NCI-H146 odvodili A. F. Gazdar a jeho spolupracovníci v roku 1979 z pleurálnej tekutiny pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Vzorka kostnej drene bola odobratá pred liečbou.
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Vytvára transplantovateľné nádory u nahých myší, ktoré sa histologicky podobajú nádorovým bunkám z pôvodnej bioptickej vzorky
Ploidný stav
Aneuploidné
Stav MSI
Stabilný (MSS)
Karyotyp
Ide o takmer triploidnú ľudskú bunkovú líniu. Modálny počet chromozómov je 68, ale často sa vyskytovali aj bunky so 66, 70 a 71 chromozómami. Chromozómy x boli párové a v preparátoch farbených QM sa nezistil žiadny chromozóm Y.

04Identifikátory

Citácia
NCI-H146 (katalógové číslo Cytion 300182)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Receptor pre inzulínu podobný rastový faktor II (IGF II)
Expresia proteínov
Bunky sa pozitívne farbia na vimentín a keratín, ale sú negatívne na neurofilamentový tripletový proteín.
Expresia antigénu
Línia exprimuje zvýšené hladiny štyroch biochemických markerov: neurón špecifickej enolázy, mozgového izoenzýmu kreatínkinázy, dekarboxylázy L-DOPA a imunoreaktivity podobnej bombesínu
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, produkt frekvencie fenotypu = 0,0009
Produkty
Bunky produkujú pomerne veľké množstvo c-myc mRNA, ale c-myc DNA sekvencie sa neamplifikujú. Bunky neexprimujú vazopresín, oxytocín ani peptid uvoľňujúci gastrín.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS
Rozmnožovanie kultúr
Bunky by sa mali subkultúrovať prenesením časti suspenzie do čerstvých nových baniek na kultiváciu buniek vopred naplnených čerstvým médiom. Prípadne sa zhluky môžu zozbierať centrifugáciou a resuspendovať v čerstvom médiu.
Hustota výsevu
1 až 2 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazovania aspoň 24 až 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
59 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský