Pāriet uz saturu
NCI-H146 šūnas
Audums
Plaušas
Slimība
Mazšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
H146, H-146, NCIH146

Dokumenti

NCI-H146 šūnas

Cell line · Preces numurs 300182

NCI-H146 šūnu līniju 1979. gadā izveidoja A.F. Gazdar un kolēģi, izmantojot pleiras šķidrumu, kas tika iegūts no pacienta ar mazšūnu plaušu vēzi. Kaulu smadzenes...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
NCI-H146 šūnu līniju 1979. gadā ieguva A. F. Gazdars (A. F. Gazdar) un viņa līdzstrādnieki no pleiras šķidruma, kas iegūts pacientam ar plaušu sīkšūnu vēzi. Kaulu smadzeņu paraugs tika ņemts pirms terapijas.
Audums
Plaušas
Slimība
Mazšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Veido transplantējamus audzējus nude pelēm, kas histoloģiski līdzinās audzēja šūnām no sākotnējā biopsijas parauga
Ploidijas statuss
Aneuploīds
MSI statuss
Stabils (MSS)
Kariotips
Šī ir gandrīz triploīda cilvēka šūnu līnija. Modālais hromosomu skaits ir 68, bet bieži sastopamas arī šūnas ar 66, 70 un 71 hromosomu. X hromosomas bija pārainas, un QM iekrāsotajos preparātos netika konstatēta Y hromosoma.

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H146 (Cytion kataloga numurs 300182)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Insulīnam līdzīgā augšanas faktora II receptoru (IGF II)
Proteīnu ekspresija
Šūnas pozitīvi krāsojas attiecībā uz vimentīnu un keratīnu, bet ir negatīvas attiecībā uz neirofilamentu tripleta proteīnu.
Antigēna ekspresija
Šī līnija uzrāda paaugstinātu četru bioķīmisko marķieru līmeni: neironiem specifiskās enolāzes, smadzeņu kreatīnkināzes izoenzīma, L-DOPA dekarboksilāzes un bombesīnam līdzīgās imūnreaktivitātes
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotipu biežuma produkts = 0,0009
Produkti
Šūnās veidojas salīdzinoši liels c-myc mRNS daudzums, bet c-myc DNS sekvences netiek pavairotas. Šūnas neizsaka vazopresīnu, oksitocīnu vai gastrīnu atbrīvojošo peptīdu.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Šūnas jākultivē, pārnesot daļu suspensijas uz jaunām šūnu kultūru kolbām, kas iepriekš piepildītas ar svaigu barotni. Alternatīvi kopas var savākt, centrifugējot, un atkārtoti suspendēt svaigā barotnē.
Sēšanas blīvums
1 līdz 2 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa vismaz 24-48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
59 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis