Siirry sisältöön
NCI-H146-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Luuydin
Synonyymit
H146, H-146, NCIH146

Asiakirjat

NCI-H146-solut

Cell line · Tuotenumero 300182

A.F. Gazdar ja hänen työryhmänsä eristivät NCI-H146-solulinjan vuonna 1979 pienisoluista keuhkosyöpää sairastavan potilaan keuhkopussinesteestä. Luuydin...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
A.F. Gazdar ja kumppanit saivat NCI-H146-solulinjan vuonna 1979 pienisoluista keuhkosyöpää sairastavan potilaan pleuranesteestä. Luuydinnäyte otettiin ennen hoitoa.
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Luuydin
Synonyymit
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Muodostaa alastomiin hiiriin siirrettäviä kasvaimia, jotka muistuttavat histologisesti alkuperäisen koepalanäytteen kasvainsoluja
Ploidisuus
Aneuploidinen
MSI-tila
Vakaa (MSS)
Karyotyyppi
Tämä on lähes triploidi ihmisen solulinja. Modaalinen kromosomiluku on 68, mutta myös soluja, joissa on 66, 70 ja 71 kromosomia, esiintyy usein. X-kromosomit olivat parittaisia, eikä Y-kromosomia havaittu QM-värjätyissä valmisteissa.

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H146 (Cytionin luettelonumero 300182)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Insuliinin kaltaisen kasvutekijä II:n reseptori (IGF II)
Proteiinin ilmentyminen
Solut värjäytyvät positiivisesti vimentiinille ja keratiinille, mutta ovat negatiivisia neurofilamentti-triplet-proteiinille.
Antigeenin ilmentyminen
Linja ilmentää kohonneita neljän biokemiallisen merkkiaineen pitoisuuksia: neuronispesifinen enolaasi, aivojen kreatiinikinaasin isoentsyymi, L-DOPA-dekarboksylaasi ja bombesiinin kaltainen immunoreaktiivisuus
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotyypin frekvenssituote = 0,0009
Tuotteet
Solut tuottavat suhteellisen suuria määriä c-myc-mRNA:ta, mutta c-myc-DNA-sekvenssit eivät monistu. Solut eivät ilmentä vasopressiinia, oksitosiinia tai gastriinia vapauttavaa peptidiä.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Solut on viljeltävä edelleen siirtämällä osa suspensiosta uusiin tuoreisiin soluviljelypulloihin, jotka on esitäytetty tuoreella elatusaineella. Vaihtoehtoisesti klusterit voidaan kerätä sentrifugoimalla ja suspendoida uudelleen tuoreeseen väliaineeseen.
Kylvötiheys
1–2 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulatuksen jälkeen solujen annetaan toipua pakastusprosessista vähintään 24-48 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
59 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen