Gå til innholdet
NCI-H146-celler
Vev
Lunge
Sykdom
Småcellet karsinom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
H146, H-146, NCIH146

Dokumenter

NCI-H146-celler

Cell line · Produktnummer 300182

NCI-H146-cellelinjen ble utviklet av A.F. Gazdar og medarbeidere i 1979 fra pleuravæske fra en pasient med småcellet lungekreft. Benmargen...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
NCI-H146-cellelinjen ble avledet av A.F. Gazdar og medarbeidere i 1979 fra pleuravæske fra en pasient med småcellet lungekreft. Benmargsprøven ble tatt før behandlingen.
Vev
Lunge
Sykdom
Småcellet karsinom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Danner transplanterbare svulster i nakenmus som histologisk ligner tumorceller fra den opprinnelige biopsiprøven
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
Stabil (MSS)
Karyotype
Dette er en nær triploid human cellelinje. Det modale kromosomantallet er 68, men celler med 66, 70 og 71 kromosomer forekommer også hyppig. X-kromosomene var paret, og det ble ikke påvist noe Y-kromosom i QM-fargede preparater.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H146 (Cytion katalognummer 300182)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Insulinlignende vekstfaktor II-reseptor (IGF II)
Proteinekspresjon
Cellene farges positivt for vimentin og keratin, men er negative for nevrofilamenttriplettprotein.
Antigenuttrykk
Linjen uttrykker forhøyede nivåer av fire biokjemiske markører: nevronspesifikk enolase, hjerne-isoenzym av kreatinkinase, L-DOPA-dekarboksylase og bombesinlignende immunreaktivitet
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotypefrekvensprodukt = 0,0009
Produkter
Cellene produserer relativt store mengder c-myc mRNA, men c-myc DNA-sekvenser blir ikke amplifisert. Cellene uttrykker ikke vasopressin, oksytocin eller gastrinfrigjørende peptid.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS
Subkultivering
Cellene bør subkultiveres ved å overføre en del av suspensjonen til nye cellekulturflasker som er fylt med nytt medium. Alternativt kan klyngene samles opp ved sentrifugering og resuspenderes i nytt medium.
Såtetthet
1 til 2 x 105 celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining skal cellene få komme seg etter fryseprosessen i minst 24 til 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
59 år
Etnisitet
Kaukasisk